流(liú)式(shì)細(xì)胞分選抗(kàng)體選(xuǎn)擇的基本條件:目(mù)標蛋白特(tè)異(yì)性,反應(yīng)種(zhǒng)屬以(yǐ)及應(yīng)用實驗。流式抗體熒(yíng)光標記的(dí)方(fāng)式(shì)包括(kuò)直接標(biāo)記和(hé)間接標(biāo)記(jì)兩種。在(zài)流式實(shí)驗(yàn)過程中(zhōng),盡量減少實驗工序和過(guò)程,以(yǐ)保證實驗的真實和準確性。因此(cǐ)在條件(jiàn)允許的範(fàn)圍內(nèi),建議(yì)盡量用直接標記(jì)的(dí)抗(kàng)體(tǐ)進行實驗而不去做間接標(biāo)記。
如(rú)果同(tóng)時檢測多個指(zhǐ)標:確(què)認(rèn)流(liú)式細胞儀能(néng)檢測(cè)多少(shǎo)個通道,流(liú)式(shì)抗體每個(gè)通道隻(zhī)能選擇(zé)1種(zhǒng)熒光(guāng)素(sù)。各(gè)個通道之(zhī)間的(dí)熒光素(sù)可以(yǐ)隨意搭配(pèi)。如(rú)實驗者(zhě)同時(shí)檢(jiǎn)測三個指(zhǐ)標,可以適(shì)當的(dí)選擇一個熒(yíng)光素標記,FITC,PE和PE-cy5。切(qiē)忌(jì)所(suǒ)有指標選擇(zé)同一個(gè)通(tōng)道的熒光標記,以防止熒(yíng)光(guāng)的重疊(dié)和相互(hù)幹擾,影響結果。因(yīn)此,流式細胞儀(yí)的通道(dào)越多(duō),同一(yī)份樣本(běn)能同(tóng)時(shí)做的(dí)表麵(miàn)/胞內標(biāo)誌就越多。
流式(shì)細胞分選(xuǎn)抗(kàng)體使用注意(yì)事(shì)項:
1.流式(shì)使用申請者可提前5天電話預約或(huò)者(zhě)到中山大學醫(yī)學(xué)院(yuàn)科技(jì)樓北(běi)806預(yù)約,至少(shǎo)提前(qián)一(yī)天(tiān)預約。
2.預約(yuē)時(shí)說明:製(zhì)備(bèi)的(dí)樣品細胞的種類(lèi),細胞的大小(xiǎo),熒光(guāng)標記(jì)的情(qíng)況(kuàng)(幾種(zhǒng)熒光(guāng)染色(sè),熒光(guāng)染(rǎn)料(liào)的激(jī)發波長和發(fā)射波(bō)長,需要的目的細胞(bāo))
3.樣(yàng)品(pǐn)請按(àn)時製備好,如果超(chāo)過預(yù)約(yuē)時(shí)間20min還(huán)沒製備好,則取消(xiāo)本次(cì)預(yù)約(yuē)時(shí)間段(duàn)的使(shǐ)用,或(huò)者(zhě)由(yóu)下一個客戶頂上。
4.每天預約的(dí)客戶要(yào)提供無(wú)菌的生(shēng)理鹽(yán)水(shuǐ),生理鹽水(shuǐ)的提供(gōng)量我們會(huì)根據客戶的樣品數確(què)定。
5.對於細胞(bāo)分(fēn)選的用戶需(xū)提(tí)供樣(yàng)品(pǐn)收(shōu)集的(dí)流(liú)式(shì)管(guǎn)(Cat:352054),流式管中(zhōng)裝(zhuāng)上4/5體(tǐ)積的培養基。
6.流(liú)式(shì)使用(yòng)完(wán)成(chéng)後(hòu),用戶清理(lǐ)實驗(yàn)過程中(zhōng)用完的物(wù)品(pǐn),以(yǐ)保持流式房(fáng)的(dí)衛生。
7.Copy數(shù)據時,請(qǐng)自帶(dài)光(guāng)盤(pán)(CD/DVD),嚴禁未(wèi)經(jīng)允許使用優(yōu)盤拷數(shù)據(jù)。