1.簡介

SepFast HighRes是一(yī)組弱陽離子交(jiāo)換(huàn)色譜填(tián)料(liào)。CM離子(zǐ)交換色譜填料(liào)SepFast HighRes專為(wéi)生(shēng)物(wù)分子的(dí)高(gāo)分(fēn)辨率純(chún)化而(ér)設計，其中(zhōng)不純(chún)的成(chéng)分(fēn)很難(nán)通(tōng)過(guò)普(pǔ)通的生物(wù)處理色譜填(tián)料分離。

CM離(lí)子(zǐ)交換(huàn)色(sè)譜填料SepFast HighRes在(zài)配體(tǐ)密度
，負(fù)載(zǎi)量(liáng)和單個(gè)組(zǔ)分的(dí)分(fēn)離能(néng)力之(zhī)間(jiān)進行了(liǎo)平衡(héng)設計(jì)，適(shì)用(yòng)於大(dà)規模生物(wù)製(zhì)造應(yīng)用。

CM離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)色譜填料SepFast HighRes的(dí)基礎(chǔ)基質由高(gāo)度交聯的較小(xiǎo)尺寸(20 - 50 µm)的(dí)瓊脂(zhī)糖(táng)珠製成(chéng)，具有出(chū)色的(dí)流(liú)動(dòng)性。它對生物加工(gōng)行業中(zhōng)遇到的大(dà)多數(shù)化學(xué)條件(jiàn)都非(fēi)常穩(wěn)定(dìng)。

2. 產品(pǐn)特性

表(biǎo)1  CM SepFast HighRes的(dí)特性

*測試條件：10  mM緩(huǎn)衝(chōng)液 pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋(dàn)白質，停留時(shí)間(jiān)5分(fēn)鐘(zhōng)，50%穿透。

3.方法(fǎ)優化(huà)

建議(yì)在載(zǎi)量
，流速(sù)
，結合pH值
，結(jié)合離(lí)子強(qiáng)度
，洗脫速(sù)度(dù)和(hé)梯度(dù)等參(cān)數(shù)之(zhī)間(jiān)進(jìn)行篩(shāi)選(xuǎn)。由於CM離(lí)子(zǐ)交換(huàn)色(sè)譜填料SepFast HighRes的(dí)快(kuài)速(sù)孔隙(xì)可(kě)及性，結合(hé)步驟可以在比洗脫(tuō)步(bù)驟(zhòu)更快的(dí)流(liú)速下(xià)完(wán)成(chéng)。建議特(tè)別(bié)注(zhù)意(yì)優化洗脫條件(jiàn)以獲(huò)得最佳分離能力(lì)。

強(qiáng)離(lí)子交換(huàn)色譜填料可以在(zài)較寬的pH範圍內保(bǎo)持其電(diàn)荷(hé)（並因此(cǐ)保持其(qí)功(gōng)能），而(ér)弱(ruò)離子交(jiāo)換色譜填料的離解程度和離(lí)子交(jiāo)換容(róng)量隨(suí)pH值而變化(huà)。因(yīn)此(cǐ)，如(rú)果使用弱離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)色(sè)譜填(tián)料，優化(huà)pH值(zhí)更為(wéi)關鍵(jiàn)。

通常在優化方(fāng)法時(shí)，平衡(héng)組分分(fēn)離度與工(gōng)藝(yì)產量(liáng)是主要考慮(lǜ)因(yīn)素。此外(wài)，對於不(bù)穩(wěn)定(dìng)或對剪(jiǎn)切(qiē)力(lì)敏(mǐn)感(gǎn)分子的(dí)純化(huà)，需(xū)要(yào)優化操作條(tiáo)件以(yǐ)平衡(héng)產量和對目標分子可能造成(chéng)的損害。

4.裝(zhuāng)柱

SepFast HighRes由高度交聯(lián)的珠狀瓊(qióng)脂(zhī)糖製(zhì)成，具(jù)有(yǒu)出色(sè)的(dí)機械強(qiáng)度。該(gāi)色譜填(tián)料可以很(hěn)容(róng)易地(dì)以(yǐ)任何可(kě)能(néng)的填充方(fāng)式填(tián)充到(dào)任何類型(xíng)的色譜柱中。典(diǎn)型(xíng)的(dí)包裝(zhuāng)壓(yā)力高(gāo)達3 bar。

5.保(bǎo)養(yǎng)

根據不(bù)同的應用(yòng)，色譜(pǔ)填料可能會(huì)被多次使(shǐ)用(yòng)。如(rú)需重復(fù)使用(yòng)，請參閱以(yǐ)下(xià)說明。

（1）再生

每次運(yùn)行(háng)後(hòu)，用(yòng)高離子強(qiáng)度溶液（例(lì)如1M NaCl緩衝液）或增(zēng)加(jiā)pH 值。

（2）就地清洗(xǐ)  (CIP)

CIP是(shì)一(yī)種去除(chú)強(qiáng)結(jié)合物質的(dí)程序，例(lì)如再(zài)生後殘留(liú)在吸附(fù)劑(jì)表麵的脂質(zhì)
，內毒(dú)素(sù)和(hé)變性(xìng)蛋白(bái)質。定(dìng)期 CIP 可(kě)防(fáng)止(zhǐ)汙(wū)染(rǎn)物在(zài)填充床中積聚(jù)，並(bìng)有助於(yú)保(bǎo)持(chí)色譜柱性能(néng)。

應根據存在(zài)的汙(wū)染物類型為(wéi)每(měi)個過程製定(dìng)具(jù)體(tǐ)的(dí) CIP程(chéng)序。CIP 的(dí)頻率取決(jué)於各個(gè)應用(yòng)的性質。

以(yǐ)下信息可(kě)作為一般指導：濃度高(gāo)達2 M的鹽可用(yòng)於(yú)清除(chú)因離(lí)子(zǐ)相互(hù)作用而(ér)結(jié)合的雜(zá)質(zhì)。疏水性結(jié)合的汙(wū)染(rǎn)物可以(yǐ)通(tōng)過(guò)以下(xià)試劑(jì)去除(chú)：1 M NaOH
，低比(bǐ)例的非(fēi)離子洗(xǐ)滌(dí)劑（例如(rú)0.1-2%）
，鹼性(xìng)或酸(suān)性條(tiáo)件下的30%  異丙醇（例如在(zài)乙酸或磷酸(suān)存在下）。也(yě)可以探索(suǒ)上(shàng)述試(shì)劑的(dí)組合。一般(bān)來說，孵育(yù)時間應該更長（例如(rú)從 30 min到2 h），以(yǐ)確保汙(wū)染物WAN全(quán)解離(lí)。

（3）消(xiāo)毒

建議使用(yòng)0.5‑1.0 M NaOH接(jiē)觸(chù)1 h進行(háng)消毒(dú)。

6.儲(chǔ)存

SepFast HighRes應儲存在20%乙(yǐ)醇中（強(qiáng)陽(yáng)離子交(jiāo)換色譜(pǔ)填料含有0.2 M NaAC）以防止(zhǐ)微生(shēng)物生(shēng)長。將(jiāng)色譜填料存儲在(zài)4℃到(dào)30℃的溫(wēn)度下(xià)。使(shǐ)用前(qián)，用至少(shǎo)5體(tǐ)積(jī)的運行緩(huǎn)衝液來平衡(héng)色(sè)譜填料。

7.更多(duō)信(xìn)息

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