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更新時(shí)間(jiān):2023-05-16
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serochem PEI轉染試劑是一種高性能轉染試劑,設計用於穩健,低成本和可擴展的瞬時基因表達。PEI是HEK293和CHO懸浮培養物瞬時轉染zui chang用的試劑。下麵以PEI Prime為例,來說明serochem PEI轉染試劑配製。
一,實驗材(cái)料(liào):
(Prime-P100-100MG),100 mL細胞培養(yǎng)級水,10 mL 0.1 M USP級(jí)*,(0.1或(huò)0.2)μm注射器過(guò)濾器,刻度(dù)100毫(háo)升(shēng)容器,無(wú)菌等(děng)分容(róng)器(聚丙(bǐng)烯(xī)或聚(jù)乙(yǐ)烯(xī))
二,實驗(yàn)設(shè)備:
分析(xī)天(tiān)平(píng),pH計,生(shēng)物(wù)安(ān)全櫃或潔(jié)淨室外(wài)殼(ké),過濾設(shè)備(bèi)(如注射器,真(zhēn)空泵)
三(sān),配(pèi)製流程:
1. 準確(què)稱量100 mg PEI Prime,將(jiāng)粉末(mò)溶(róng)於(yú)80mL細(xì)胞培養級水中。攪拌(bàn)幾(jī)分鐘(zhōng)來溶解(jiě)粉末。
注意:混合(hé)後(hòu)可能會(huì)殘(cán)留(liú)微(wēi)量固體。如果(guǒ)存在(zài),將在稍後(hòu)的步驟中移除,這些不(bù)會影(yǐng)響性能。
2. 逐(zhú)漸(jiàn)向(xiàng)PEI Prime中加入0.1 M*溶(róng)液,同時用pH計監(jiān)測(cè),將pH調(tiáo)節至7.0 +/- 0.1,在(zài)加入*之(zhī)後(hòu)充(chōng)分(fēn)混合。注(zhù)意:使用(yòng)少於(yú)10ml的*溶(róng)液(yè)
3. 添加細胞培(péi)養(yǎng)級(jí)水(shuǐ),使PEI Prime溶液使(shǐ)總體積(jī)達到100ml。
4. 在(zài)無(wú)菌(jūn)環境中(zhōng),如(rú)清(qīng)潔(jié)的生(shēng)物安全機(jī)櫃(guì)或潔淨(jìng)室(shì),對(duì)溶(róng)液進行無菌(jūn)過濾,用(0.1或(huò)0.2)μm注射(shè)器過(guò)濾器將(jiāng)溶液(yè)無(wú)菌過濾到無菌(jūn)儲(chǔ)存(cún)容器中。
注意(yì):建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用(yòng)PES過濾(lǜ)膜;尼(ní)龍膜也(yě)可(kě)行。
5. 在4°C的(dí)溫度(dù)下(xià)給容(róng)器貼上標(biāo)簽,可儲(chǔ)存長達6個月(yuè)。
注意:不要(yào)冷凍,不(bù)要(yào)使(shǐ)用冷(lěng)凍過一次以(yǐ)上(shàng)的等(děng)分(fēn)試樣(yàng)。
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