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更新時(shí)間(jiān):2023-09-04
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酶聯免(miǎn)疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫(xiě)ELISA或ELASA)指(zhǐ)將(jiāng)可溶性的抗原或(huò)抗(kàng)體結合(hé)到聚(jù)苯(běn)乙烯(xī)等固相載體(tǐ)上,利(lì)用(yòng)抗原(yuán)抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免(miǎn)疫反(fǎn)應的定(dìng)性和定量(liáng)檢(jiǎn)測(cè)方法。
1971年Engvall和Perlmann發表(biǎo)了(liǎo)酶聯免(miǎn)疫吸附(fù)劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用於IgG定(dìng)量測定的文章,使(shǐ)得1966年(nián)開始用於抗(kàng)原定位的(dí)酶標(biāo)抗(kàng)體技(jì)術發展(zhǎn)成(chéng)液(yè)體標(biāo)本中微量物(wù)質(zhì)的(dí)測定方法(fǎ)。這一方法(fǎ)的(dí)基(jī)本(běn)原理是:①使抗(kàng)原或抗體結合(hé)到(dào)某種固(gù)相(xiāng)載(zǎi)體(tǐ)表麵,並保持其免疫活(huó)性。②使(shǐ)抗(kàng)原或(huò)抗體(tǐ)與某種酶連(lián)接成酶標抗原或(huò)抗體(tǐ),這(zhè)種(zhǒng)酶標抗原或抗體(tǐ)既保(bǎo)留(liú)其(qí)免疫活(huó)性,又保留(liú)酶(méi)的(dí)活(huó)性。在測定時,把受檢標(biāo)本(běn)(測定(dìng)其中(zhōng)的(dí)抗(kàng)體或抗原(yuán))和酶標抗(kàng)原(yuán)或抗體按(àn)不(bù)同的步(bù)驟與(yǔ)固相(xiāng)載體表(biǎo)麵(miàn)的(dí)抗原或(huò)抗(kàng)體(tǐ)起(qǐ)反(fǎn)應(yīng)。用洗滌的方(fāng)法使(shǐ)固相載體上形成的抗(kàng)原抗體(tǐ)復(fù)合物與(yǔ)其(qí)他(tā)物質分(fēn)開,最(zuì)後(hòu)結(jié)合在(zài)固(gù)相載體(tǐ)上的酶(méi)量(liáng)與(yǔ)標本中受(shòu)檢(jiǎn)物質的量(liáng)成一(yī)定(dìng)的比例(lì)。加入(rù)酶反應的底物後(hòu),底物(wù)被(bèi)酶(méi)催(cuī)化變(biàn)為有(yǒu)色產(chǎn)物(wù),產物的(dí)量與(yǔ)標(biāo)本(běn)中受檢物質的量直接相關,故可根(gēn)據(jù)顏色反應(yīng)的(dí)深(shēn)淺有無(wú)定性或定量分(fēn)析。由於(yú)酶(méi)的催化效率很高,故可(kě)極(jí)大地放大(dà)反(fǎn)應效果,從(cóng)而(ér)使測定方法(fǎ)達(dá)到很(hěn)高的敏(mǐn)感度。
在實際應(yīng)用(yòng)中,通過不同的(dí)設(shè)計(jì),具體的方法(fǎ)步(bù)驟可有(yǒu)多(duō)種。即:用於(yú)檢(jiǎn)測(cè)抗(kàng)體(tǐ)的間接法,用於檢測(cè)抗原(yuán)的(dí)雙(shuāng)抗體夾心(xīn)法(fǎ)以及(jí)用(yòng)於(yú)檢測(cè)小分(fēn)子(zǐ)抗原(yuán)或(huò)半抗原的(dí)抗原(yuán)競(jìng)爭法(fǎ)等等(děng)。比較常用的是雙抗體夾(jiā)心(xīn)法(fǎ)及間接法。更(gēng)多(duō)有關(guān)ELISA內(nèi)容,請聯係天津益元利康生物(wù)科(kē)技(jì)有限(xiàn)公司:

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