RNA是目(mù)前(qián)發(fā)現細胞內生物功能(néng)zui豐富多樣的生物大分子
，同時是(shì)DNA與蛋(dàn)白質信(xìn)息傳(chuán)遞(dì)的(dí)橋(qiáo)梁
，因此(cǐ)完整(zhěng)RNA的提取和純(chún)化是功(gōng)能(néng)基(jī)因(yīn)組時代的重要手(shǒu)段。那(nà)麼(mó)你(nǐ)知(zhī)道RNA提取的(dí)注(zhù)意事項(xiàng)都有哪些嗎
？讓(ràng)我們(mén)一(yī)起來(lái)看看吧(bā)！

一，如(rú)何(hé)保(bǎo)存(cún)提取出(chū)的RNA
？

提取(qǔ)後(hòu)溶(róng)解於RNase-free Water中(zhōng)
，RNA樣品(pǐn)建議(yì)立即進(jìn)行下遊(yóu)實(shí)驗(yàn)
，如需(xū)儲(chǔ)存
，建(jiàn)議分(fēn)裝保存於(yú)-80℃。避免(miǎn)多次取用樣(yàng)品(pǐn)
，反復(fù)凍融。

二，為什麼提取的RNA有(yǒu)降(jiàng)解
？

1.使(shǐ)用的組織材(cái)料(liào)不新鮮。提取RNA應(yīng)采用(yòng)新鮮的組織材料(liào)
，或將新鮮組織材料用液(yè)氮迅凍(dòng)後(hòu)置於(yú)-80℃保存(cún)。

2.提取(qǔ)RNA時(shí)使(shǐ)用的試劑(jì)及(jí)耗材(cái)中混有RNase。

3.提取的組織材料中(zhōng)含(hán)有(yǒu)大量內源(yuán)RNase。

三，RNA分離過程中水相(xiāng)與(yǔ)有(yǒu)機相(xiāng)分離不(bù)wan全(quán)
，提取(qǔ)的(dí)RNA含(hán)量低。

可(kě)能是氯(lǜ)仿(fǎng)混合不充(chōng)分
，離心(xīn)時轉(zhuǎn)速不(bù)夠或離心時(shí)間太短。使(shǐ)得(dé)回收的RNA水相(xiāng)低於500 µL。

四，如(rú)何(hé)防(fáng)止(zhǐ)提取(qǔ)RNA過程(chéng)中RNA的(dí)降解
？

1.實驗(yàn)過(guò)程中(zhōng)使用的(dí)玻璃(lí)器(qì)皿使(shǐ)用(yòng)前(qián)可於(yú)180 ℃幹烤8 h以上(shàng)
，塑料製(zhì)品要用氯(lǜ)仿衝洗。焦(jiāo)磷酸二(èr)乙(yǐ)酯（DEPC）是RNase的(dí)強烈抑製劑
，RNA提取過程(chéng)和逆(nì)轉錄(lù)過(guò)程(chéng)中所用(yòng)的水用(yòng)DEPC處理；

2.實(shí)驗人員(yuán)的手為RNase的(dí)重要(yào)汙染源
，進(jìn)行(háng)RNA實驗時(shí)應(yīng)始(shǐ)終(zhōng)戴(dài)手(shǒu)套
，並應勤(qín)換手(shǒu)套；

3.提取(qǔ)的(dí)樣(yàng)品(pǐn)材料(liào)應盡可能(néng)新鮮
，如(rú)果(guǒ)不(bù)能及時提(tí)取(qǔ)RNA
，取樣(yàng)後應保存於液氮(dàn)中。

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