你知道什(shí)麼是(shì)二(èr)抗(kàng)嗎(má)？讓我(wǒ)們(mén)一(yī)起(qǐ)來看(kàn)看吧(bā)！

一(yī)
，二(èr)抗(kàng)的定義

第(dì)二抗(kàng)體(tǐ)（二(èr)抗）是(shì)在其它宿(sù)主體內(nèi)製備(bèi)的能與一抗(kàng)或一抗(kàng)片段(duàn)結(jié)合的(dí)抗(kàng)體，即(jí)抗(kàng)體的(dí)抗(kàng)體(tǐ)，其主(zhǔ)要作用是(shì)檢測抗體的(dí)存(cún)在，放大(dà)一抗(kàng)的信(xìn)號(hào)。二抗是利用一(yī)抗是大分子的蛋白質(zhì)具有抗原性(xìng)的性(xìng)質(zhì)，去免(miǎn)疫異(yì)種動物(wù)，由異種動物的免疫係(xì)統產(chǎn)生(shēng)的針對於此(cǐ)抗(kàng)體的免(miǎn)疫球(qiú)蛋(dàn)白(bái)。二(èr)抗針對(duì)某一(yī)特定物(wù)種（如小(xiǎo)鼠）的所(suǒ)有抗(kàng)體(tǐ)（如IgG
，IgM或IgA等）均(jūn)具有反應性。

二
，二(èr)抗的設(shè)計原(yuán)理(lǐ)

根(gēn)據同一(yī)種來(lái)源的同種亞型(xíng)抗體(tǐ)的(dí)恒定(dìng)區(qū)是(shì)保守的，以此充當抗(kàng)原刺激(jī)機(jī)體產生的抗體(tǐ)可以(yǐ)識別(bié)同種亞型一抗，根(gēn)據(jù)這(zhè)一(yī)原理設計製(zhì)備(bèi)二抗。

抗(kàng)IgG (H+L)恒定區(qū)
：靶(bǎ)向一抗(kàng)的(dí)重(zhòng)鏈(liàn)和輕鏈恒定區(qū)。這(zhè)些抗(kàng)體也(yě)會(huì)與(yǔ)其(qí)他類(如IgE
，IgD等(děng))發(fā)生反(fǎn)應，因(yīn)為這些類之間(jiān)共享(xiǎng)輕鏈。更(gēng)廣(guǎng)泛的(dí)表(biǎo)位(wèi)識別(H+L)二(èr)抗使其適用於大多(duō)數(shù)需(xū)要(yào)二(èr)抗的(dí)免疫分析。

抗(kàng)IgG Fc片段或重(zhòng)鏈恒(héng)定(dìng)區
：與(yǔ)抗IgG (H+L)二(èr)抗(kàng)不(bù)同，靶向(xiàng)一(yī)抗Fc區(qū)域或重(zhòng)鏈的二(èr)抗具有類特(tè)異(yì)性(xìng)，不會(huì)與(yǔ)其他(tā)類免(miǎn)疫(yì)球(qiú)蛋(dàn)白發(fā)生反(fǎn)應，因為每(měi)一種(zhǒng)抗體(tǐ)的重(zhòng)鏈或者Fc片(piàn)段(duàn)是(shì)不(bù)一(yī)樣的（見圖2）。如果(guǒ)打算(suàn)在(zài)Ip後進行Western blotting分(fēn)析(xī)，建議(yì)使用重鏈特異(yì)性(xìng)二(èr)抗來(lái)檢(jiǎn)測位(wèi)於25kDa分子(zǐ)量附近的(dí)目標蛋(dàn)白，以(yǐ)避(bì)免(miǎn)輕鏈的幹(gān)擾(rǎo)。此(cǐ)外(wài)，Fab片段(duàn)抗Fc二抗可用(yòng)於一(yī)抗在多次標記(jì)實驗孵育(yù)前(qián)預標記。

抗IgG輕(qīng)鏈(liàn)恒(héng)定(dìng)區:靶(bǎ)向(xiàng)一(yī)抗的輕鏈(liàn)(kappa或lambda)。這些抗(kàng)體不(bù)與(yǔ)一(yī)抗重(zhòng)鏈反應(yīng)，但識(shí)別(bié)其他免疫球蛋白類的共享輕(qīng)鏈。例(lì)如，山羊抗(kàng)人IgG Kappa輕鏈二抗不僅(jǐn)能識別IgG亞(yà)類，還能(néng)識(shí)別IgA
，IgD
，IgE
，IgM等(děng)輕(qīng)鏈(liàn)。在Ip後進(jìn)行Western blotting分(fēn)析時，建(jiàn)議使(shǐ)用(yòng)輕鏈(liàn)特(tè)異(yì)性(xìng)二抗來(lái)檢(jiǎn)測來檢測(cè)位(wèi)於55kDa分(fēn)子量(liáng)附(fù)近的目標蛋白，以(yǐ)避免重(zhòng)鏈(liàn)的幹(gān)擾。

抗IgG F(ab’)2片段(duàn)恒定區
：靶向於(yú)一抗的F(ab’)2片段(duàn)區。由於(yú)識別(bié)了(liǎo)F(ab)區域(yù)的共(gòng)享輕鏈(liàn)，它(tā)們會與IgA
，IgD
，IgE
，IgM等(děng)輕(qīng)鏈發生反應(yīng)。

三
，二抗(kàng)的(dí)優(yōu)勢(shì)

與僅(jǐn)使用標記一(yī)抗直接檢(jiǎn)測目標(biāo)物相比，使用(yòng)二抗(kàng)識別一抗(kàng)間(jiān)接檢測目(mù)標物(wù)具(jù)備(bèi)多種(zhǒng)優勢。

通(tōng)用性
：二抗針對某(mǒu)一特(tè)定物種（如小(xiǎo)鼠）的所有(yǒu)抗(kàng)體(tǐ)均具(jù)有(yǒu)特異(yì)性(xìng)，因(yīn)而(ér)使用標(biāo)記的二抗可以免去對每(měi)一個(gè)一(yī)抗進行(háng)標記(jì)，大大節省了時間(jiān)和(hé)費用(yòng)。

放大信號(hào)
：一個(gè)一(yī)抗分子(zǐ)可以(yǐ)同時(shí)結(jié)合幾個(gè)標(biāo)記二(èr)抗(kàng)分(fēn)子，從而增(zēng)強信(xìn)號並提高(gāo)檢測靈敏度。在有些檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，可使用生(shēng)物素(sù)化(huà)的(dí)二抗和(hé)鏈(liàn)黴親和(hé)素(sù)偶聯的(dí)標(biāo)記分(fēn)子(zǐ)來進(jìn)一步(bù)增強信號。

允許進(jìn)行(háng)多重(zhòng)檢(jiǎn)測(cè)實(shí)驗(yàn)
：由於二抗具有物(wù)種特(tè)異(yì)性，因(yīn)此可以將實驗(yàn)設(shè)計為使用源自(zì)不同物(wù)種(zhǒng)的一抗來檢測多(duō)種目標物。使用與(yǔ)具(jù)有不同(tóng)波長發(fā)射光(guāng)的(dí)熒(yíng)光染料(liào)標(biāo)記(jì)的(dí)二(èr)抗來(lái)檢(jiǎn)測不同(tóng)的目(mù)標物。

保留互(hù)補(bǔ)位
：一(yī)抗與標記分子(zǐ)的偶聯，有可能會(huì)影響(xiǎng)其(qí)抗(kàng)原結(jié)合位(wèi)點，也稱(chēng)為互補(bǔ)位(wèi)。這(zhè)將降(jiàng)低(dī)一抗與(yǔ)其靶(bǎ)抗原結(jié)合的(dí)能力。使用(yòng)標記二(èr)抗後，可(kě)以在檢測中使用(yòng)未偶聯(lián)的一(yī)抗而避免(miǎn)影響其與(yǔ)抗(kàng)原的結(jié)合。

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