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當(dāng)前(qián)位置:首(shǒu)頁技術文(wén)章(zhāng)培養基中各類添(tiān)加成分(fēn)所具有的(dí)作(zuò)用(yòng)是什麼(mó)?

培養基(jī)中各類添加成(chéng)分所(suǒ)具(jù)有的作用是什(shí)麼(mó)?

更新(xīn)時間:2024-02-21點擊次數(shù):1545

細(xì)胞培養(yǎng)基(jī)是(shì)供給(gěi)細(xì)胞(bāo)營養(yǎng),維持(chí)細胞(bāo)生(shēng)長和增(zēng)殖(zhí)的多(duō)種(zhǒng)營養物(wù)質的(dí)混合物,基礎細胞培養(yǎng)基(jī)主(zhǔ)要包(bāo)括199,MEM,RPMI-1640,DMEM,DMEM/F12等(děng)。主要(yào)成分是氨基酸(suān),維生(shēng)素(sù),碳(tàn)水(shuǐ)化(huà)合物(wù),無機(jī)鹽和(hé)其它一些輔助物質。人工(gōng)合成培(péi)養基(jī)使用(yòng)時還需(xū)添加一(yī)定量(liáng)的(dí)血(xiě)清使細胞生長(cháng)和繁殖。培養基(jī)中各類(lèi)添(tiān)加成分所具有的作用是(shì)什麼?一起學習下(xià)吧!

L-穀氨(ān)酰胺 (L-Glutamine)
是細胞培(péi)養液體環境中(zhōng)所(suǒ)必(bì)需(xū)的(dí)一種(zhǒng)營養成(chéng)分,是細(xì)胞(bāo)生長(cháng)的必(bì)須氨基(jī)酸,為(wéi)培養(yǎng)的(dí)細胞(bāo)提(tí)供(gōng)重要(yào)的能量來(lái)源(yuán)。脫掉氨基後,L-穀氨酰(xiān)胺(àn)可作(zuò)為培養細胞(bāo)的能(néng)量(liáng)來源(yuán),參與蛋(dàn)白質(zhì)的合成和核酸代(dài)謝(xiè)。但其在水溶液中不穩定,易(yì)降解(jiě)產生(shēng)對細(xì)胞有(yǒu)害的氨(ān);而氨對於一些細(xì)胞具有毒性。

L-丙(bǐng)氨酰-L-穀氨(ān)酰胺(àn)(L-alanyl-L-glutamine)

在水溶液中十(shí)分穩定,不會自發(fā)降(jiàng)解(jiě),其被(bèi)細(xì)胞(bāo)利用的(dí)機(jī)製為:細胞(bāo)在(zài)培養(yǎng)時會向(xiàng)培(péi)養(yǎng)液(yè)中釋放一種(zhǒng)肽(tài)酶,將L-丙(bǐng)氨(ān)酰(xiān)-L-穀氨(ān)酰胺逐漸水解(jiě)成(chéng)L-丙(bǐng)氨(ān)酸和L-穀(gǔ)氨酰胺(àn),這(zhè)種將低(dī)濃度(dù)水平的L-穀氨酰胺(àn)逐(zhú)漸釋放到(dào)培(péi)養(yǎng)液(yè)中(zhōng)的過(guò)程類似(sì)於流加(jiā)培養策略(lüè),可以提(tí)高(gāo)L-穀(gǔ)氨酰胺(àn)的利用率(shuài),且不會(huì)產(chǎn)生多餘(yú)的氨,更利於(yú)細(xì)胞的生長(cháng)。L-丙氨(ān)酰-L-穀氨酰胺(àn)適(shì)用(yòng)於所(suǒ)有(yǒu)的細胞,幾(jī)乎(hū)無(wú)需適應,並且可以(yǐ)延長(cháng)細(xì)胞(bāo)的培(péi)養(yǎng)時(shí)間,減(jiǎn)少傳代次數(shù),細(xì)胞活(huó)性(xìng)降低得更慢。L-丙(bǐng)氨酰-L- 穀氨酰(xiān)胺的添加(jiā)可能(néng)導(dǎo)致(zhì)延滯期略(lüè)微(wēi)延長,其原(yuán)因(yīn)是肽(tài)酶的釋放和二肽(tài)的(dí)消化需要(yào)一定(dìng)的時(shí)間(jiān),但不(bù)會影(yǐng)響(xiǎng)後續培養(yǎng)。

丙酮酸(suān)鈉(Sodium pyruvate)

可以作為(wéi)細胞培養中(zhōng)的(dí)替代(dài)碳源,在(zài)葡萄糖(táng)不足的時候,細胞(bāo)可(kě)以(yǐ)代(dài)謝丙酮酸(suān)鈉(nà),保證細胞更好地生(shēng)長。

HEPES (4-羥(qiǎng)yi基哌qin乙(yǐ)磺酸)

是一種常(cháng)用非離子(zǐ)兩性緩(huǎn)衝液(yè),能有效控製pH在6.8~8.2範(fàn)圍,尤其在pH7.2~7.4具(jù)有(yǒu)較好的(dí)緩(huǎn)衝(chōng)能(néng)力。在(zài)開放式培養或細胞觀察時(shí)能(néng)維持(chí)較恒定pH值(zhí)。因此是(shì)一(yī)種優(yōu)良的生物(wù)緩衝(chōng)劑(jì),對細(xì)胞無毒(dú)性作(zuò)用,培(péi)養基(jī)添(tiān)加(jiā)HEPES後能夠較長(cháng)時間保(bǎo)持恒定(dìng)的pH範圍,可以有(yǒu)效的(dí)防止(zhǐ)培養(yǎng)液(yè)pH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞(bāo)生(shēng)長狀態產(chǎn)生(shēng)的不利(lì)影響(xiǎng)。與(yǔ)其(qí)他緩衝(chōng)液(yè)如(rú)PBS相比,HEPES在維持細(xì)胞培養(yǎng)基(jī)的pH值(zhí)方麵(miàn)具有更高(gāo)的(dí)穩定(dìng)性。

酚(fēn)紅(hóng)

酚(fēn)紅(hóng)在(zài)培養(yǎng)基中被(bèi)用(yòng)來(lái)作為(wéi)pH值(zhí)的指(zhǐ)示劑(jì),用以持(chí)續(xù)監測培養液的酸(suān)鹼度,在(zài)低pH值時酚(fēn)紅使培養(yǎng)液呈黃色(sè),而較高的(dí)pH值時使培養液呈(chéng)紫(zǐ)色,pH值7.2~7.4時為紅(hóng)色,最(zuì)shi合細胞培養。但酚紅也有一(yī)些缺(quē)點,研(yán)究表(biǎo)明酚(fēn)紅(hóng)可(kě)以模擬固醇類激素 (特(tè)別是(shì)雌(cí)激(jī)素)的(dí)作用,因(yīn)此在(zài)用(yòng)到雌(cí)激(jī)素敏(mǐn)感(gǎn)的細(xì)胞時 (如乳腺組織(zhī)),最(zuì)好(hǎo)使用不含(hán)酚(fēn)紅(hóng)的培養基(jī)。酚紅會(huì)幹(gān)擾(rǎo)流(liú)式(shì)細胞(bāo)分(fēn)析(xī)時(shí)候的(dí)檢(jiǎn)測(cè)。此外(wài),一(yī)些(xiē)無(wú)血(xiě)清(qīng)培(péi)養(yǎng)基(jī)的(dí)配方(fāng)中(zhōng)若存在酚紅(hóng)會幹擾鈉-鉀(jiǎ)平衡。
以(yǐ)上(shàng)就(jiù)是有關(guān)培(péi)養基(jī)中各類添加(jiā)成(chéng)分所具有的作(zuò)用是(shì)什麼的問題解(jiě)答(dá),如(rú)果你(nǐ)有(yǒu)更(gēng)多(duō)補(bǔ)充(chōng)請(qǐng)咨詢(xún)天(tiān)津益元利(lì)康客服(fú)!


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