產(chǎn)品(pǐn)名稱：通(tōng)用(yòng)基(jī)因組DNA 小(xiǎo)量提取試劑盒

產品(pǐn)貨號：TD468-50 (50 次(cì)反應)

       TD468-200 (200 次(cì)反(fǎn)應)

注(zhù)意事(shì)項：

1. 售出(chū)後一年內(nèi)產品(pǐn)質(zhì)量可(kě)以保證。試劑已(yǐ)經過大(dà)量的常(cháng)規(guī)檢測(cè)來(lái)保證(zhèng)其(qí)可操作性。此(cǐ)產品僅(jǐn)供(gōng)研究(jiū)並(bìng)且需(xū)要由專業人(rén)員來(lái)使用(yòng)。

2. 試(shì)劑盒中的部(bù)分試(shì)劑(jì)是有(yǒu)刺(cì)激性(xìng)的。請帶(dài)好手套(tào)和防護眼(yǎn)鏡(jìng)。

3. 環境溫度(dù)低(dī)時基因組(zǔ)樣(yàng)本(běn)消(xiāo)化液(yè)或者基因(yīn)組(zǔ)DNA洗(xǐ)滌液1可能(néng)出現(xiàn)析出和沉(chén)澱
，可(kě)以(yǐ)在(zài)37℃水浴幾分(fēn)鐘(zhōng)幫助(zhù)重新溶解(jiě)使(shǐ)用。

產品(pǐn)特性(xìng)：

樣品(pǐn)種類(lèi): 全血
，有核血
，血(xiě)kuaI黃層
，唾(tuò)液
，痰(tán)
，精子
，乳汁等樣品(pǐn)
，保(bǎo)存(cún)在保護劑裏的(dí)樣(yàng)品(pǐn)等。獲(huò)得的基(jī)因(yīn)組(zǔ) DNA 產量(liáng)高，純度(dù)好
， 可以直(zhí)接用(yòng) PCR 等(děng)各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。不(bù)推薦(jiàn)使(shǐ)用(yòng)此試劑盒提(tí)取小 DNA 或者(zhě)遊(yóu)離 DNA(可(kě)使用 TD476 產品) 

基因(yīn)組(zǔ) DNA 大(dà)小: 一般(bān)可(kě)回收(shōu)到(dào)大於 50 kb 的基(jī)因組(zǔ) DNA。如果(guǒ)樣品(pǐn)中(zhōng)存在(zài)綫粒體(tǐ)DNA
，病毒DNA等(děng)也會一起(qǐ)提取到(dào)。

DNA 純(chún)度(dù): 獲得的(dí)基因(yīn)組(zǔ) DNA 產(chǎn)量高(gāo)，純度(dù)好
， 可以直(zhí)接用(yòng) PCR 等各種分(fēn)子生(shēng)物學實(shí)驗(yàn)。一(yī)般(bān)情(qíng)況(kuàng) Abs260/280 ≥ 1.8 Abs260/230 ≥ 2.0。

基因組 DNA 產量: 針(zhēn)對(duì)哺乳(rǔ)動(dòng)物(wù)一(yī)般 100µl 全(quán)血中回收(shōu)到 3µg 以(yǐ)上的(dí)基因組DNA。

需(xū)要的儀器(qì)設(shè)備(bèi): 水(shuǐ)浴(yù)鍋或者金(jīn)屬浴（55℃）。微(wēi)型離心(xīn)機
，渦旋儀。

溶液(yè)製(zhì)備(bèi)：

在(zài)操(cāo)作之(zhī)前
，需添(tiān)加1060µl蛋(dàn)白酶K保存液(yè)到(dào)每管(guǎn)蛋(dàn)白(bái)酶K（20mg）中。蛋(dàn)白酶K溶液的濃(nóng)度為(wéi)20mg/ml,混(hùn)匀(yún)後(hòu)
，需(xū)要放(fàng)到-20℃長期(qī)保存。

提(tí)取步驟(zhòu)：

使(shǐ)用(yòng)基因(yīn)組DNA洗(xǐ)脫液或其他(tā)等滲溶(róng)液（如PBS）來重(zhòng)懸(xuán)培養的細(xì)胞沉澱(diàn)。

(≤1x106細(xì)胞(bāo)使(shǐ)用100μI基因組(zǔ)DNA洗(xǐ)脫液(yè)
，106-5x106細胞數使(shǐ)用(yòng)200μI基(jī)因組(zǔ)DNA洗脫(tuō)液)

55℃下(xià)的蛋白(bái)酶(méi)K過液消化(huà)不會影(yǐng)響(xiǎng)DNA的完整(zhěng)性。

4. 將上清轉(zhuǎn)移至 2L 柱(zhù)中
，2L 柱套在(zài)一個收集(jí)管(guǎn)裏
，在(zài)≥12,000 x g 離(lí)心力(lì)下離(lí)心(xīn)1 分鐘。丟(diū)棄盛有(yǒu)濾出(chū)液的收(shōu)集管。

5. 將(jiāng) 2L 柱套(tào)在一個新(xīn)的收集(jí)管裏(lǐ)
，添(tiān)加(jiā) 400μl 的基因(yīn)組(zǔ) DNA 洗滌液 1 到(dào) 2L 柱中(zhōng)
，在≥12,000 x g離(lí)心力下離心1分鐘(zhōng)。倒掉(diào)收集(jí)管中(zhōng)的廢(fèi)液(yè)。

6. 添加 700μl 的(dí)基(jī)因組 DNA 洗(xǐ)滌(dí)液 2 到(dào) 2L 柱中(zhōng)
，在≥12,000 x g 離心(xīn)力下(xià)離心1 分鐘(zhōng)。倒(dǎo)掉(diào)收集管中的(dí)廢(fèi)液(yè)。7. 添加(jiā) 200μl 的(dí)基因組 DNA 洗(xǐ)滌液 2 到 2L 柱中
，在≥12,000 x g 離(lí)心力(lì)下(xià)離(lí)心1 分鐘(zhōng)。丟棄盛(shèng)有(yǒu)濾(lǜ)出(chū)液的(dí)收集管。

8. 將 2L 柱移至幹(gān)淨(jìng)的(dí) 1.5ml 離心(xīn)管(guǎn)中(zhōng)直接添加≥ 50μl 的基(jī)因(yīn)組 DNA 洗脫液(yè)到(dào)柱(zhù)基質上(shàng)（洗(xǐ)脫(tuō)液事(shì)先在(zài)65-70℃水浴(yù)中(zhōng)預熱效果(guǒ)更(gēng)好(hǎo)
，如果(guǒ)是 25mg 的(dí)組(zǔ)織(zhī)可(kě)以添加 200μl）
，室溫下放(fàng)置 2-5 分鐘
，全(quán)速(sù)離(lí)心1分(fēn)鐘(zhōng)來(lái)洗脫(tuō)基(jī)因組 DNA。

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