常(cháng)見核酸(suān)提取純化(huà)方法(fǎ)苯酚氯仿抽提法(fǎ)，磁珠(zhū)法核酸分離技(jì)術(shù)，離(lí)心(xīn)柱(zhù)純(chún)化法(fǎ)等(děng)
，今天(tiān)我(wǒ)們來(lái)看下(xià)離(lí)心柱法(fǎ)的實驗步(bù)驟和(hé)優缺(quē)點吧~

一，離(lí)心柱(zhù)法提(tí)取(qǔ)DNA步(bù)驟

離(lí)心(xīn)柱法(fǎ)提取(qǔ)DNA步驟一

 將組織或細胞(bāo)懸液加(jiā)入裂(liè)解緩衝(chōng)液(yè)
，渦旋(xuán)混(hùn)匀
。裂解緩衝(chōng)液中(zhōng)含有(yǒu)變(biàn)性(xìng)劑（如胍異(yì)硫氰(qíng)酸鹽(yán)）
，可以有效地裂(liè)解細(xì)胞和(hé)組織
，破壞細胞膜和(hé)細(xì)胞核膜
，同(tóng)時(shí)使(shǐ)核酸(suān)與(yǔ)蛋(dàn)白(bái)質(zhì)分離(lí)
。

離心(xīn)柱(zhù)法(fǎ)提取(qǔ)DNA步(bù)驟(zhòu)二(èr)

 將(jiāng)裂(liè)解(jiě)液轉(zhuǎn)移到DNA Spin Column中
，離心收集(jí)流穿液(yè)
。這(zhè)個步(bù)驟(zhòu)涉及(jí)到(dào)將(jiāng)裂解液通過一個(gè)特(tè)殊的膜過(guò)濾
，該(gāi)膜具(jù)有(yǒu)特定的孔(kǒng)徑
，允許小分子如RNA和(hé)蛋(dàn)白質通過
，而(ér)DNA由(yóu)於其較(jiào)大(dà)的分子(zǐ)尺寸被(bèi)截留在(zài)膜(mó)上(shàng)
。

離心柱法(fǎ)提(tí)取DNA步(bù)驟(zhòu)三(sān)

 用(yòng)Washing Buffer洗滌(dí)DNA柱膜(mó)
。Washing buffer中含有乙醇(chún)和(hé)鹽
，可(kě)以去除雜質(zhì)和(hé)蛋白(bái)質(zhì)
，保(bǎo)留DNA在(zài)柱(zhù)膜(mó)上(shàng)
。

離心(xīn)柱法(fǎ)提取DNA步(bù)驟四

 將Elution Buffer加入到柱中(zhōng)
，離心收集純化(huà)的DNA
。Elution Buffer是(shì)低鹽(yán)緩衝(chōng)液
，能(néng)有(yǒu)效洗(xǐ)脫柱膜上結合(hé)的DNA
，得(dé)到(dào)純(chún)化的(dí)基因組DNA
。因為DNA在低(dī)鹽條件(jiàn)下(xià)更(gēng)容易溶(róng)解
。離心後(hòu)
，收集純化的DNA到一個新的(dí)收集(jí)管(guǎn)中
。

離心(xīn)柱法提取(qǔ)DNA步驟五(wǔ)

 提取(qǔ)完(wán)成後
，使(shǐ)用紫外(wài)分光光度(dù)計(jì)測定DNA的濃度和純(chún)度
，通過(guò)測定260nm和280nm的(dí)吸(xī)光(guāng)度(dù)比值(zhí)來(lái)評(píng)估(gū)DNA的質量(liáng)和蛋(dàn)白(bái)質(zhì)汙(wū)染情況(kuàng)
。

離(lí)心柱(zhù)法(fǎ)提取DNA步驟六

 純化的(dí)DNA應妥善(shàn)存儲於(yú)-20°C或更(gēng)低(dī)的(dí)溫(wēn)度下
，以保持(chí)其穩(wěn)定性(xìng)和(hé)防(fáng)止降(jiàng)解(jiě)
。

二，離(lí)心柱(zhù)法提(tí)取DNA的優缺點：

1. ‌優(yōu)點‌

操(cāo)作(zuò)簡便
，適合微(wēi)量操(cāo)作
。

使用(yòng)常見(jiàn)的試劑(jì)和藥品
，成本較低(dī)
。

2. ‌缺點‌

高度依賴吸附(fù)膜(mó)的結合(hé)能(néng)力
。

洗(xǐ)脫不wanquan可能導(dǎo)致(zhì)核(hé)酸(suān)流失
。

無法大量提取(qǔ)核(hé)酸
。

據小(xiǎo)編所知(zhī)
，凡知醫(yī)學，中科百(bǎi)抗有(yǒu)多款離心(xīn)柱式(shì)提取(qǔ)核酸產(chǎn)品
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