一，細胞(bāo)活力(lì)檢測CCK8法實驗(yàn)步(bù)驟

1.取生長狀(zhuàng)態良好的(dí)細胞，調整細胞(bāo)密度，按每孔(kǒng)100 μL細(xì)胞(bāo)懸(xuán)液(yè)接種於96孔板中(zhōng)，同(tóng)時設空白孔（不(bù)加細胞但是(shì)加入同(tóng)體積(jī)的培(péi)養(yǎng)基）。

注(zhù)：通常細(xì)胞(bāo)增殖(zhí)實(shí)驗(yàn)每孔(kǒng)加入100 μL約含(hán)2000個(gè)細胞，細胞(bāo)毒性(xìng)實(shí)驗每(měi)孔加入(rù)100 μL約含5000個(gè)細(xì)胞（具(jù)體每(měi)孔所用的(dí)細(xì)胞(bāo)的(dí)數目(mù)，需根據細胞(bāo)的(dí)大(dà)小，細胞增殖(zhí)速度的(dí)快慢等(děng)決(jué)定）。

2.根據(jù)實(shí)驗(yàn)設計(jì)對(duì)細胞進(jìn)行培(péi)養(yǎng)和(hé)處理。

3.每孔加入(rù)10 μL的CCK-8溶(róng)液(yè)。繼(jì)續孵育(yù)1~4 h。

注：CCK-8孵育條件與細胞培養(yǎng)條件相(xiāng)同(tóng)。

4. 用酶(méi)標儀(yí)測(cè)定(dìng)在450 nm處的吸光(guāng)度(dù)。

二，細胞活力檢(jiǎn)測(cè)CCK8法(fǎ)結果計(jì)算

細胞存(cún)活率(shuài)(%)

=(OD_sample−OD_blank)/(OD_control−OD_blank)×100%

抑(yì)製率(shuài)(%)

=(OD_control−OD_sample)/(OD_control−OD_blank)×100%

[注(zhù)]:  OD_sample：實驗孔的(dí)OD值(zhí)

OD_control：對照孔的(dí) OD 值

OD_blank：空白孔的OD值(zhí)

三(sān)，產品推薦(jiàn)

產品英(yīng)文名稱：Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)

貨(huò)號(hào)：E-CK-A362

規格：500Tests，100Tests，500Tests×20

檢測(cè)原(yuán)理：WST-8 (2-(2-甲氧(yǎng)基(jī)-4-硝(xiāo)苯(běn)基)-3-(4-硝(xiāo)苯(běn)基(jī))-5-(2,4-二磺基(jī)苯)-2H-四(sì)唑(zuò)單鈉(nà)鹽(yán))，在電(diàn)子載體存(cún)在(zài)的(dí)情(qíng)況下，WST-8被綫(xiàn)粒(lì)體(tǐ)內的脫(tuō)氫(qīng)酶還原生成水溶(róng)性(xìng)的橙黃色formazan，生成的formazan的(dí)量與(yǔ)活細(xì)胞數量成正比(bǐ)，通過(guò)檢測在450 nm處的吸光(guāng)度，可以(yǐ)間接計算活細(xì)胞(bāo)的量(liáng)。

檢測(cè)方法(fǎ)：比(bǐ)色法

樣(yàng)本(běn)類型：細胞(bāo)

檢測(cè)儀(yí)器(qì)：酶標儀

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