臍帶間充(chōng)質幹細胞(bāo)(UCMSCs)是(shì)一種來源(yuán)於(yú)臍帶(dài)的(dí)多潛能幹細胞，具有廣(guǎng)泛的應(yīng)用前景(jǐng)
。臍帶間(jiān)充質幹細胞(bāo)可以在(zài)進(jìn)行UCMSCs的復(fù)蘇過(guò)程中，需要注(zhù)意以下幾(jī)個(gè)主要步驟：
 

　　臍(qí)帶間充(chōng)質幹細胞(bāo)(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)是一(yī)種來源於臍(qí)帶的多潛能幹(gān)細胞(bāo)，具(jù)有(yǒu)廣(guǎng)泛的(dí)應用前景
。這些(xiē)幹細(xì)胞具有較強(qiáng)的自(zì)我更新(xīn)能力和多(duō)向(xiàng)分化潛(qián)能，能夠(gòu)分化為多(duō)種(zhǒng)細(xì)胞類型，如(rú)骨(gǔ)細(xì)胞(bāo)，肌肉(ròu)細(xì)胞，神經細胞等(děng)
。
 

　　臍帶間(jiān)充(chōng)質(zhì)幹(gān)細胞無(wú)血(xiě)清培(péi)養基(jī)可用於臍帶(dài)間充質(zhì)幹(gān)細胞(bāo)的原(yuán)代培養(yǎng)及多次(cì)傳代，同時還(huán)能保持其(qí)多(duō)向(xiàng)分(fēn)化的潛能(néng)，如分化(huà)為骨細胞，軟(ruǎn)骨(gǔ)細胞等(děng)，使用(yòng)時(shí)無需添(tiān)加(jiā)血(xiě)清或血(xiě)清(qīng)替代(dài)物
。
 

　　以下(xià)是(shì)使用(yòng)臍帶(dài)間(jiān)充質(zhì)幹細胞無(wú)血清培養(yǎng)基(jī)進(jìn)行臍(qí)帶(dài)間充(chōng)質幹(gān)細(xì)胞復(fù)蘇的流程：
 

　　(1)將臍(qí)帶(dài)間充質(zhì)幹細胞(bāo)無血清培(péi)養基平衡至(zhì)室(shì)溫(wēn)，每個(gè)培養瓶(píng)加入(rù)15ml 的臍(qí)帶(dài)間充(chōng)質幹(gān)細(xì)胞(bāo)無血(xiě)清培(péi)養(yǎng)基
。
 

　　(2)取出(chū)凍存的(dí)細胞(bāo)，置入(rù)37℃水浴(yù)鍋(guō)中(zhōng)快(kuài)速(sù)解凍
。
 

　　(3)立(lì)即吸取解(jiě)凍後(hòu)的細(xì)胞(bāo)懸(xuán)液轉移(yí)1ml至15ml離心(xīn)管中，逐(zhú)滴加入(rù)4ml臍(qí)帶(dài)間(jiān)充(chōng)質幹細胞(bāo)無血(xiě)清培養(yǎng)基(jī)，混匀(yún)後計數
。
 

　　(4)根(gēn)據計數(shù)結果，按照合(hé)適的(dí)接(jiē)種密(mì)度(dù)(推(tuī)薦(jiàn)8000cells/cm2)
。將細(xì)胞接(jiē)種到(dào)已加入(rù)15ml 臍帶(dài)間充質(zhì)幹細胞無血清培養(yǎng)基的細胞(bāo)培養(yǎng)容器(qì)中(zhōng)
。
 

　　注(zhù)：若(ruò)細胞凍存液中不含DMSO，可(kě)將(jiāng)細胞直(zhí)接加入20ml臍(qí)帶間充質(zhì)幹(gān)細(xì)胞(bāo)無(wú)血清(qīng)培(péi)養(yǎng)基中(zhōng)，且(qiě)第二(èr)天(tiān)無需(xū)換(huàn)液
。
 

　　(5)將細(xì)胞(bāo)放(fàng)在37℃，5% CO2培養箱中(zhōng)培養(yǎng)
。
 

　　(6)12h~24h後(hòu)，待(dài)細(xì)胞(bāo)正常貼(tiē)壁，棄去(qù)培(péi)養上(shàng)清(qīng)，加入(rù)新(xīn)鮮的，已平(píng)衡至室溫(wēn)的20ml臍(qí)帶(dài)間充(chōng)質(zhì)幹(gān)細(xì)胞(bāo)無血(xiě)清培養(yǎng)基
。根(gēn)據(jù)細胞(bāo)生長(cháng)情況，每(měi)3天換液至(zhì)細胞融(róng)合(hé)度達到(dào)80%~90%
。
 

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