問充(chōng)質幹(gān)細胞(MSC)是一(yī)種源自中胚層的(dí)多能(néng)幹(gān)細(xì)胞
，能夠從(cóng)骨，脂肪，臍帶，胎(tāi)盤(pán)，臍(qí)血，皮(pí)膚等多(duō)樣的(dí)組(zǔ)織(zhī)裏(lǐ)分(fēn)離獲取(qǔ)
，具有*的(dí)增殖能力(lì)和(hé)多向分化潛能
，不僅能分(fēn)化為(wéi)成骨細(xì)胞，軟骨細(xì)胞，脂肪(fáng)細(xì)胞(bāo)等
，還能分(fēn)化為肌(jī)細(xì)胞，肝細(xì)胞，胰(yí)島細(xì)胞(bāo)等(děng)多種(zhǒng)細(xì)胞(bāo)類(lèi)型(xíng)。間(jiān)充(chōng)質(zhì)幹細胞(bāo)在(zài)組(zǔ)織工程(chéng)，基(jī)因(yīn)治療和(hé)免拉治療(liáo)等諾(nuò)多方麵(miàn)展現(xiàn)出巨(jù)大的應用前(qián)景(jǐng)
，為(wéi)醫(yī)學領(lǐng)域帶(dài)來了(liǎo)新的(dí)希望和突(tū)破方(fāng)向(xiàng)
，對於多(duō)種(zhǒng)疾(jí)病(bìng)的治(zhì)療和研究都有著重要(yào)意(yì)義。

一，小(xiǎo)鼠脂肪組織(zhī)獲(huò)取(qǔ)

1.3天(tiān)齡(líng)到(dào)4周(zhōu)齡(推薦(jiàn)小周齡(líng))小型
，頸椎(zhuī)脫(tuō)白(bái)法(fǎ)處死後於(yú)75%酒(jiǔ)精浸(jìn)10min。

2.將小鼠(shǔ)橫向
，背麵朝上放置(zhì)
，背(bèi)部中(zhōng)心嬰(yīng)向剪(jiǎn)開皮(pí)膚1cm;沿著開口處撕去腹股(gǔ)溝(gōu)皮(pí)膚(fū)
，暴露對稱的腹股溝部位(wèi)白色(sè)胎(tāi)肪組(zǔ)織
，鈍(dùn)性(xìng)剝離(lí)。

二(èr)，胎肪MSC分離培(péi)養(酶(méi)消(xiāo)化(huà)法(fǎ))

1. 消化:取脂(zhī)肪組(zǔ)織25mL
，4°℃ PBS衝(chōng)洗3次
，去除筋膜(mó)及紅(hóng)細(xì)胞
，眼(yǎn)科(kē)剪剪碎(suì)
，4°CPBS衝洗3次
，每5mL脂防分(fēn)裝入(rù)50mL離心管
，加(jiā)入(rù)2倍(bèi)體(tǐ)積的0.075961型(xíng)膠原(yuán)
，37℃恒溫(wēn)搖(yáo)床(chuáng)以(yǐ)80r/min的搖速震蕩(dàng)消(xiāo)化1h
，待(dài)充分(fēn)消(xiāo)化後
，加(jiā)入與(yǔ)酶等體積的含10%FBS的(dí)DMEM-F12完quan培(péi)養(yǎng)基(jī)終止(zhǐ)消(xiāo)化。

2. 離(lí)心(xīn)與計(jì)數(shù):300g
，離心(xīn)10min
，去(qù)除上(shàng)層未(wèi)消(xiāo)化(huà)的脂肪組(zǔ)織，油(yóu)脂(zhī)及中(zhōng)層(céng)潔(jié)液(yè)
，5mL紅細胞裂解液重懸沉(chén)澱
，室溫靜置(zhì)5min
，200g
，離心(xīn)5min
，去除上清液
，完(wán)quan培養(yǎng)基(jī)重懸沉(chén)澱
，200日(rì)網過(guò)濾後
，取樣(yàng)計數
，根(gēn)據計數結(jié)果調(tiáo)整細胞濃度(dù)
，最終以(1-5)x101/cm2接(jiē)種(zhǒng)於培養皿中(zhōng)
，置於37℃℃
，5%C0,培養(yǎng)箱(xiāng)中(zhōng)培養(yǎng)。

3. 接種培養:48h後換液
，之(zhī)後每3d換一(yī)次液
，待細胞(bāo)生長至80%-90%融合(hé)時(shí)
，用體(tǐ)積分(fēn)數0.25%膚蛋白酶(méi)消化後按(àn)1:2傳(chuán)代培(péi)養(yǎng)。

天津益(yì)元利康(kāng)生物科技有限(xiàn)公司(sī)
，成(chéng)立於2018年(nián)
，坐落(là)於天(tiān)津經濟技(jì)術開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品綫(xiàn)涉及細胞與基(jī)因(yīn)治(zhì)療(liáo)，免疫(yì)學，分子(zǐ)生物(wù)學，細(xì)胞(bāo)生物學等(děng)多(duō)個(gè)方向
，專(zhuān)注於(yú)生(shēng)命科學試劑(jì)，耗材(cái)，細(xì)胞，儀器等(děng)產品銷(xiāo)售
，經(jīng)營(yíng)的(dí)品(pǐn)牌主要有(yǒu)：ThermoFisher，Sigma，Qiagen，EZBioscience，ZYMO Research，MedKoo，Abcam，BioLegend等(děng)等(děng)。我們(mén)提(tí)供質優價(jià)美的產品(pǐn)，及(jí)時(shí)到位的(dí)服務(wù)
，努力(lì)成長(cháng)為生(shēng)命科學(xué)和(hé)生物技術(shù)企業的優質供應商。