一(yī),Moltox菌株的核心(xīn)特(tè)點(diǎn)與(yǔ)原理(lǐ)
這些(xiē)菌(jūn)株經過(guò)精(jīng)心(xīn)設(shè)計,具(jù)有以下共(gòng)同特征,使其(qí)能夠靈(líng)敏地檢測出遺傳毒性(xìng)物質:
1. 組氨(ān)酸(suān)營養缺陷(xiàn)型(xíng)(His⁻):
這(zhè)是Ames試驗的(dí)基礎(chǔ)。這(zhè)些菌(jūn)株(zhū)自(zì)身(shēn)不(bù)能合成組氨酸(一種(zhǒng)必需(xū)氨基(jī)酸(suān)),因此(cǐ)在(zài)沒有組氨酸(suān)的(dí)培(péi)養基上(shàng)無法(fǎ)生長(cháng)形(xíng)成菌(jūn)落。
回復突變:如(rú)果受試化合物能(néng)引(yǐn)起DNA突變,使菌株恢復合(hé)成組(zǔ)氨(ān)酸的能力(lì)(His⁻ → His⁺),這些(xiē)回(huí)復(fù)突(tū)變菌(jūn)就(jiù)能在無(wú)組氨酸的培(péi)養(yǎng)基上生(shēng)長形(xíng)成可(kě)見的(dí)菌落。菌落(là)數(shù)目的(dí)多少與化(huà)合物(wù)的(dí)致突變性強(qiáng)弱(ruò)成正比(bǐ)。
2. 細(xì)胞壁通(tōng)透性增(zēng)強(rfa突變):
菌株攜(xié)帶(dài)`rfa`突變,導致(zhì)其細(xì)胞壁(bì)外(wài)層(céng)的脂(zhī)多糖(LPS)屏(píng)障(zhàng)不完整(zhěng),使得大分(fēn)子化合物(如苯並芘(bì)等多環芳烴)更(gēng)容易進(jìn)入細胞內(nèi)部(bù),提高(gāo)了(liǎo)檢測(cè)靈敏(mǐn)度。
3. DNA修(xiū)復(fù)係統(tǒng)缺(quē)陷(xiàn)(ΔuvrB):
菌(jūn)株缺(quē)失了`uvrB`基因,導(dǎo)致其切除修復係(xì)統功能(néng)喪(sāng)失(shī)。這使得DNA損(sǔn)傷(shāng)難(nán)以被正確修復(fù),突(tū)變更容易被(bèi)固定和積(jī)累(léi),進一(yī)步增強(qiáng)了(liǎo)檢測的(dí)敏感性。
4. 攜(xié)帶R因(yīn)子(zǐ)質(zhì)粒(lì)(pKM101):
許多Moltox菌(jūn)株(zhū)(如TA98, TA100)體內(nèi)含有(yǒu)一(yī)個(gè)名為pKM101的質粒(lì)。
該(gāi)質粒(lì)能增強(qiáng)細(xì)胞的SOS應急(jí)修(xiū)復反(fǎn)應(yīng)(一種(zhǒng)容易(yì)出錯的(dí)修復方式),從而提高(gāo)對許多(duō)致突(tū)變(biàn)劑(jì)的敏(mǐn)感性。
二,常(cháng)見的Moltox菌株(zhū)及(jí)其特(tè)性(xìng)
以(yǐ)下是一些常用,具代表性(xìng)的Moltox菌(jūn)株(zhū):

三,Moltox菌株(zhū)如何使(shǐ)用:
Ames試驗流(liú)程(chéng)簡(jiǎn)述
1. 準(zhǔn)備(bèi)菌株:復蘇(sū)並(bìng)培(péi)養Moltox菌(jūn)株。
2. 製(zhì)備(bèi)受(shòu)試物:將待測化(huà)合物溶解(jiě)在適當(dāng)的溶劑(jì)中。
3. 混(hùn)合與誘(yòu)導:將菌(jūn)液,受(shòu)試(shì)物以(yǐ)及S9代(dài)謝活化係統(tǒng)(模(mó)擬哺(bǔ)乳動物(wù)肝(gān)髒代(dài)謝(xiè)功能,用(yòng)於(yú)檢測(cè)前(qián)致(zhì)癌物(wù))在頂層(céng)瓊(qióng)脂(zhī)中(zhōng)混合。
4. 鋪板(bǎn):將混合物倒入葡(pú)萄糖瓊脂(zhī)平板(無組氨酸)上。
5. 培養:在(zài)37°C下(xià)培(péi)養(yǎng)48-72小時。
6. 計(jì)數(shù):計(jì)數每板上回變菌(jūn)落的數量(liáng)。
7. 結(jié)果判定:如(rú)果 test substance 組的(dí)回變(biàn)菌落數是陰性對(duì)照(zhào)組的兩(liǎng)倍(bèi)或以(yǐ)上,並具有劑量-反應關(guān)係,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(具有致突變(biàn)性)。
—— 總結
Moltox菌株是(shì)Ames試(shì)驗的(dí)標準化,商(shāng)業(yè)化(huà)工具。
它們(mén)通過多(duō)重遺(yí)傳修飾(組(zǔ)氨(ān)酸(suān)缺(quē)陷,細(xì)胞(bāo)壁通透性(xìng)增加,DNA修復(fù)缺(quē)陷(xiàn),攜帶R因子)來檢(jiǎn)測遺傳(chuán)毒性(xìng)的敏感性。
不同(tóng)菌(jūn)株檢(jiǎn)測(cè)不同(tóng)類別(bié)的突變(移碼(mǎ)突變 vs. 鹼(jiǎn)基置換(huàn)),因此在實踐中(zhōng)通常需要(yào)一組菌株(zhū)(如TA98, TA100, TA1535, TA97, TA102)來全(quán)麵(miàn)評(píng)估(gū)化合(hé)物的(dí)致(zhì)突(tū)變潛力(lì)。
這些(xiē)菌(jūn)株為全球(qiú)的遺傳(chuán)毒(dú)理(lǐ)學研(yán)究(jiū)和風險(xiǎn)評估提(tí)供了(liǎo)至(zhì)關重要(yào),不可(kě)替(tì)代的工(gōng)具。
購(gòu)買渠道(dào):
Moltox菌(jūn)株——天津益元利康(kāng)生(shēng)物科技有限公司(sī)
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