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更新(xīn)時間(jiān):2025-12-08
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一(yī),GoldBio熒光(guāng)素(sù)鉀鹽核(hé)心概(gài)述
GoldBio的熒光素(sù)鉀鹽,是(shì)螢光(guāng)素酶的天(tiān)然底物(wù)。在(zài)ATP和(hé)氧氣的存在(zài)下(xià),螢光(guāng)素酶(méi)會催(cuī)化熒光素(sù)發(fā)生氧化反(fǎn)應,產生生(shēng)物(wù)發光(guāng)信號(發出波長(cháng)為(wéi)560nm左(zuǒ)右的(dí)黃(huáng)綠(lǜ)色(sè)光(guāng))。
二(èr),GoldBio熒光素鉀鹽如(rú)何(hé)使(shǐ)用(標(biāo)準流程(chéng)簡述)
通(tōng)常需(xū)要(yào)將其配製(zhì)成工(gōng)作(zuò)液。一(yī)個常見的體(tǐ)外(wài)檢測(cè)配方如下:
1. 配(pèi)製儲(chǔ)存(cún)液(如100mM):
稱(chēng)取(qǔ)適量(liáng)熒(yíng)光素(sù)鉀(jiǎ)鹽(yán)粉(fěn)末,溶(róng)於pH 7.8左(zuǒ)右的(dí)緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)(如 Tris,HEPES)或(huò)無(wú)菌(jūn)水中。
過濾除菌(jūn),分(fēn)裝(zhuāng)避光保存(cún)於-20°C或-80°C。
2. 配(pèi)製(zhì)工(gōng)作液(1X):
使用前,將儲存液用檢測(cè)緩衝(chōng)液(yè)稀釋至(zhì)所(suǒ)需濃度(通(tōng)常為0.1-1mM)。
工作液中(zhōng)通常還需加入輔酶A,以(yǐ)穩定發(fā)光信號,獲(huò)得(dé)持續的(dí)“輝光型(xíng)”發光而非一(yī)閃而過(guò)的(dí)“閃(shǎn)光(guāng)型(xíng)”。
3. 檢測(cè):
對(duì)於細胞(bāo):棄(qì)去(qù)培養液(yè),加入(rù)工作(zuò)液,裂解細(xì)胞並混(hùn)匀後(hòu),立(lì)即用酶標(biāo)儀(yí)(化(huà)學發光(guāng)模塊)或發(fā)光計檢測(cè)。
對於動物:腹(fù)腔(qiāng)注(zhù)射(shè)一定(dìng)劑量(如150mg/kg)的熒(yíng)光(guāng)素鉀(jiǎ)鹽(溶於PBS),等(děng)待(dài)約(yuē)10-15分鐘讓其(qí)在體內分布(bù)均匀後,進(jìn)行(háng)成像。
三,GoldBio熒光素(sù)鉀鹽優勢與注意(yì)事(shì)項(xiàng)
優(yōu)勢:
性價比高(gāo):相比(bǐ)許(xǔ)多(duō)品牌的(dí)預(yù)混檢測試劑盒(hé),自(zì)行購(gòu)買粉末(mò)配製成本更低(dī),尤(yóu)其適合大批(pī)量實(shí)驗。
靈(líng)活性高(gāo):可根據實驗(yàn)需求自(zì)行優(yōu)化工作液(yè)的(dí)配(pèi)方(如緩(huǎn)衝液(yè)pH,離子強(qiáng)度,添加輔酶A等)。
水溶(róng)性好(hǎo):鉀(jiǎ)鹽(yán)形式(shì)解決(jué)了(liǎo)溶解(jiě)難題(tí)。
四(sì),GoldBio熒光(guāng)素鉀鹽注意事項
1. 避光保(bǎo)存(cún):熒(yíng)光素對光敏(mǐn)感(gǎn),粉末(mò)和溶(róng)液(yè)均應(yīng)避光(guāng)保(bǎo)存(cún),以(yǐ)防降解(jiě)。
2. 無菌(jūn)操(cāo)作:用(yòng)於體(tǐ)內(nèi)注射時(shí),溶液必(bì)須經過(guò)無菌(jūn)過濾(0.22μm濾(lǜ)膜(mó)),並確(què)保(bǎo)無(wú)熱原。
3. pH敏感(gǎn)性:螢(yíng)光(guāng)素(sù)酶反應的(dí)最適pH約(yuē)為(wéi)7.8,緩(huǎn)衝液pH至(zhì)關重要。
4. 體(tǐ)內注射(shè)濃度:需(xū)根據動(dòng)物模型(xíng)和成(chéng)像係統(tǒng)優化(huà)注(zhù)射劑量(liáng)和(hé)成(chéng)像時(shí)間。
五(wǔ),總(zǒng)結與選(xuǎn)購(gòu)建議
GoldBio的(dí)熒光素(sù)鉀(jiǎ)鹽是(shì)一款(kuǎn)可靠(kào),經(jīng)濟(jì)的(dí)基礎(chǔ)性發光底物。
如果(guǒ)您(nín)需(xū)要(yào):自(zì)行(háng)建(jiàn)立或大(dà)量進行螢光素酶(méi)報告基(jī)因實驗(yàn),ATP檢(jiǎn)測(cè),或(huò)為活(huó)體成(chéng)像配製(zhì)注(zhù)射劑,那(nà)麼(mó)購買(mǎi)GoldBio的(dí)熒光(guāng)素鉀(jiǎ)鹽粉末自行配(pèi)製,是(shì)具成本效益的選擇。
如(rú)果您需要(yào):進行(háng)少(shǎo)量,便捷的(dí)常(cháng)規(guī)報(bào)告(gào)基因(yīn)檢測(cè),且(qiě)對(duì)操(cāo)作(zuò)便(biàn)捷性要求(qiú)高,那麼(mó)直接(jiē)購買預混好的“輝光型(xíng)”螢(yíng)光(guāng)素酶檢測試(shì)劑盒(如(rú)Promega, Beyotime等(děng))可能(néng)更節省(shěng)時(shí)間(jiān)和(hé)保(bǎo)證結(jié)果穩(wěn)定(dìng)性。
簡(jiǎn)單來說(shuō),GoldBio熒光(guāng)素鉀(jiǎ)鹽(yán)是“原材(cái)料(liào)”,適合(hé)動(dòng)手(shǒu)配製和(hé)優(yōu)化體係的用戶;而(ér)試劑(jì)盒是“即食餐”,適合追求標(biāo)準化和快速流(liú)程的(dí)用(yòng)戶。
GoldBio,Promega, Beyotime代理(lǐ)——天(tiān)津益(yì)元利康生物(wù)科(kē)技有限公司(sī),歡迎咨(zī)詢選(xuǎn)購。
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