條(tiáo)件重編程(chéng)培養(yǎng)基(jī)（Conditionally Reprogrammed Cell Medium, CRC Medium）是近年來(lái)細胞生物學和腫(zhǒng)瘤(liú)學研究(jiū)中(zhōng)的(dí)一(yī)項革命性(xìng)技術。

這(zhè)項技(jì)術(shù)能(néng)讓正(zhèng)常上皮細胞(bāo)和(hé)腫瘤(liú)細胞在(zài)體外快速(sù)，近(jìn)乎無(wú)限地(dì)增殖，而(ér)不(bù)會發生惡性轉(zhuǎn)化或(huò)改變其原有的(dí)基(jī)因組特(tè)性(xìng)。

一(yī)， 條(tiáo)件重編程細胞培(péi)養核心(xīn)原(yuán)理：一個“時(shí)間暫停"的開關(guān)

傳(chuán)統原代細(xì)胞培養麵臨兩(liǎng)大難題：1）細胞壽命有限，傳幾次(cì)代(dài)就(jiù)衰老(lǎo)；2）很(hěn)多(duō)細胞（如(rú)正常(cháng)上皮細(xì)胞）在體外(wài)難以存(cún)活和(hé)擴增。

CR技(jì)術巧(qiǎo)妙地解決(jué)了這(zhè)個(gè)問題。其核心原理在於(yú)，通(tōng)過兩種關(guān)鍵成分的(dí)協同(tóng)作用(yòng)，暫(zàn)時(shí)性(xìng)地，可逆(nì)地“關(guān)閉"了(liǎo)細胞衰(shuāi)老(lǎo)和(hé)分化的程序，同時(shí)強(qiáng)烈(liè)激活了(liǎo)細胞的幹性/再(zài)生(shēng)潛能，使(shǐ)其進(jìn)入一種高(gāo)速自(zì)我更新(xīn)的“祖細胞(bāo)"狀態(tài)。一旦(dàn)移除(chú)這些成(chéng)分(fēn)，細(xì)胞(bāo)又能恢(huī)復(fù)正常的生(shēng)長(cháng)，分(fēn)化和衰(shuāi)老(lǎo)進程(chéng)。

簡(jiǎn)單比(bǐ)喻(yù)：它不(bù)是(shì)讓(ràng)細胞(bāo)“yong久變身"，而是給(gěi)細胞打(dǎ)了(liǎo)一(yī)劑 “暫(zàn)停分化，全力(lì)增殖"的臨(lín)時強心(xīn)針(zhēn)。

二(èr)， 條件重編程細(xì)胞培養培(péi)養(yǎng)基的關鍵(jiàn)成分

一(yī)個完(wán)整的CR培(péi)養體(tǐ)係包(bāo)含兩大部分(fēn)：

1.  飼(sì)養(yǎng)層(céng)細胞：通(tōng)常是經過(guò)輻照處理的小鼠3T3-J2成纖維(wéi)細胞(bāo)。它們(mén)不分(fēn)裂，但(dàn)能分泌(mì)關(guān)鍵(jiàn)的(dí)細胞外基質(zhì)和生長因子，為上皮(pí)細胞提供(gōng)zui接(jiē)近體(tǐ)內的物(wù)理和生化微環(huán)境(jìng)，是(shì)CR成(chéng)功(gōng)的物理基礎(chǔ)。

2.  條件(jiàn)重編程(chéng)培養(yǎng)基：在基(jī)礎培養基（如(rú)DMEM/F12）中添(tiān)加以(yǐ)下兩(liǎng)類(lèi)核心成(chéng)分：

       Rho激(jī)酶抑(yì)製劑(jì)：zui常(cháng)用(yòng)且關(guān)鍵的(dí)是 Y-27632。它的作用是(shì)：

           抑製ROCK信號通路，強烈(liè)抑製(zhì)細胞凋(diāo)亡(wáng)，顯著(zhù)提高細胞(bāo)貼壁和(hé)存(cún)活(huó)率(shuài)。

           促進(jìn)細胞去分化(huà)，增(zēng)強其(qí)增殖和克隆(lóng)形成能力。

       飼養層細胞條件培(péi)養(yǎng)基(jī)：收集培(péi)養過(guò)3T3-J2細胞(bāo)的培養基上(shàng)清(qīng)，含有其(qí)分泌的(dí)多(duō)種生(shēng)長因子（如EGF，FGF等），是(shì)激活和(hé)支持細(xì)胞(bāo)增殖(zhí)的生化基(jī)礎。

典(diǎn)型配(pèi)方 = 基(jī)礎培養(yǎng)基 + 10% 胎(tāi)牛血清(qīng) + Rho激(jī)酶抑製(zhì)劑 + 飼養(yǎng)層細胞(bāo)條(tiáo)件(jiàn)培(péi)養(yǎng)基。

三(sān)， 條件重編(biān)程細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)突出優(yōu)勢與應(yīng)用(yòng)場景

四， 條(tiáo)件(jiàn)重編程細胞培(péi)養(yǎng)主要供(gōng)應商

您無(wú)需(xū)自己配(pèi)製(zhì)，多(duō)家公司提供成熟的CR培(péi)養(yǎng)基(jī)試(shì)劑盒或(huò)核心(xīn)組(zǔ)分：

   Thermo Fisher Scientific：提供 “Gibco™ 條(tiáo)件重編程試(shì)劑盒"，這是zui有名，引用(yòng)zui廣(guǎng)的商業(yè)化(huà)產品，包含優化(huà)好的培養基，添加(jiā)劑和(hé)詳細的培養方(fāng)案。

   STEMCELL Technologies：提(tí)供(gōng) “IntestiCult™類器(qì)官(guān)生長(cháng)培養(yǎng)基(jī)" 等相關產品，其原理(lǐ)與(yǔ)CR技(jì)術有共(gòng)通之處，常用(yòng)於腸道(dào)等(děng)類器官(guān)培(péi)養(yǎng)。

   Sigma-Aldrich / Merck：提(tí)供核心小分子抑製劑(jì) Y-27632。

   國產(chǎn)品牌(pái)：如(rú)北(běi)京義(yì)翹(qiáo)神州等生物科技公司也(yě)提供相關的細胞培(péi)養(yǎng)添加劑。

五， 重要(yào)注(zhù)意事項(xiàng)

1.  汙染風(fēng)險(xiǎn)：使(shǐ)用小鼠(shǔ)飼(sì)養(yǎng)層(céng)細胞，存(cún)在(zài)引(yǐn)入鼠源(yuán)病原體（如支(zhī)原體(tǐ)）或細胞(bāo)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)的風險(xiǎn)。需嚴(yán)格進行(háng)物種(zhǒng)鑒定和(hé)病原(yuán)檢測。

2.  成本較高：商業(yè)試劑(jì)盒和(hé)飼養層細胞(bāo)的維護成(chéng)本相對傳統培養(yǎng)要高(gāo)。

3.  技術門(mén)檻(jiàn)：需要同時(shí)維持飼養層(céng)細(xì)胞(bāo)和目的細胞(bāo)的培(péi)養(yǎng)，操(cāo)作(zuò)步(bù)驟(zhòu)比常規(guī)培(péi)養(yǎng)更(gēng)繁瑣。

4.  並非(fēi)wan能：對某些(xiē)類(lèi)型的(dí)細(xì)胞（如一些(xiē)間(jiān)葉(yè)來源(yuán)的腫(zhǒng)瘤(liú)）效果可能(néng)不(bù)佳(jiā)。

總結

條件(jiàn)重編(biān)程培養(yǎng)基(jī)及(jí)其(qí)技術(shù)，是(shì)連接臨床樣本與(yǔ)體外(wài)研究的強力橋(qiáo)梁。它使得(dé)從患者(zhě)身(shēn)上(shàng)獲取的微(wēi)量組(zǔ)織(zhī)（如穿(chuān)刺活檢(jiǎn)）能夠(gòu)快速(sù)擴增，用(yòng)於實(shí)時藥敏(mǐn)測(cè)試或建(jiàn)立(lì)生物(wù)樣本庫(kù)，極(jí)大(dà)地推動了(liǎo)個(gè)體化精準醫(yī)療(liáo)和(hé)轉化醫學的(dí)發展(zhǎn)。對於(yú)從(cóng)事(shì)腫(zhǒng)瘤學，上皮細(xì)胞生物學和再(zài)生醫學的研究(jiū)者而言，這是(shì)一(yī)項*工(gōng)具。

天(tiān)津(jīn)益元利(lì)康生物(wù)科(kē)技(jì)有限公司(sī)可(kě)提供條(tiáo)件編(biān)程培(péi)養(yǎng)基，包(bāo)括但(dàn)不限(xiàn)於(yú)Thermo Fisher ，sigma，STEMCELL 等品牌，歡迎(yíng)咨詢(xún)。

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