Ezb DNA/RNA/組織提(tí)取試劑盒(hé)通過*裂解液(yè)熱處(chǔ)理(lǐ)和蛋白(bái)酶K共(gòng)同(tóng)作用(yòng)迅(xùn)速裂解細(xì)胞(bāo)釋(shì)放(fàng)出基因(yīn)組DNA,然後(hòu)基(jī)因(yīn)組(zǔ)DNA在(zài)高(gāo)離序鹽(yán)狀(zhuàng)態下選(xuǎn)擇性(xìng)吸(xī)附於(yú)離心柱內矽基質(zhì)膜(mó),再通(tōng)過一(yī)係列(liè)快速的漂洗-離(lí)心的步驟(zhòu),抑(yì)製(zhì)物去除(chú)液和漂(piāo)洗液(yè)將(jiāng)細胞代謝物,蛋白等(děng)雜(zá)質(zhì)去除,從(cóng)低鹽的(dí)洗(xǐ)脫(tuō)緩(huǎn)衝液(yè)將(jiāng)純淨基(jī)因組DNA從(cóng)矽基質膜(mó)上洗脫(tuō)。
Ezb DNA/RNA/組織提取試(shì)劑(jì)盒(hé)特(tè)點(diǎn):
1.離心吸(xī)附柱內矽基質膜全(quán)部采用(yòng)特(tè)製(zhì)吸附(fù)膜,柱與(yǔ)柱(zhù)之間吸附量差(chà)異極(jí)小(xiǎo),可重(zhòng)復性(xìng)好。克(kè)服(fú)了國產(chǎn)試劑(jì)盒(hé)膜質量(liáng)不(bù)穩定的弊(bì)端。
2.不需要(yào)使用(yòng)有(yǒu)毒的苯酚等試劑,也不(bù)需(xū)要(yào)乙醇(chún)沉(chén)澱(diàn)等步(bù)驟。
3.快速(sù),簡捷,單(dān)個樣(yàng)品操作(zuò)一(yī)般可在(zài)30分鐘(zhōng)內完成。
4.多次柱(zhù)漂洗(xǐ)確保高(gāo)純度,OD260/OD280典(diǎn)型(xíng)的(dí)比(bǐ)值達1.7~1.9,長度(dù)可(kě)達(dá)30kb-50kb,可(kě)直接用於PCR,Southern-blot和各(gè)種酶(méi)切反應。
Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒注意事項:
1.所(suǒ)有(yǒu)的(dí)離心(xīn)步驟均在(zài)室(shì)溫完成,使用(yòng)轉(zhuǎn)速可以(yǐ)達(dá)到(dào)13,000rpm的傳(chuán)統台式(shì)離心機(jī),如Eppendorf5415C或者類(lèi)似(sì)離(lí)心機(jī)。
2.需要(yào)自備乙(yǐ)醇(需要準(zhǔn)備100%/80%/60%/40%不(bù)同濃度)或者(zhě)二(èr)甲苯。
3.實驗前將需要的水(shuǐ)浴先(xiān)預熱(rè)到37℃備(bèi)用(yòng)。
4.結合液(yè)CB和抑(yì)製(zhì)物去(qù)除(chú)液(yè)IR中含(hán)有刺激(jī)性(xìng)化(huà)合物,操作(zuò)時(shí)要戴乳膠手(shǒu)套,避(bì)免沾(zhān)染(rǎn)皮(pí)膚,眼睛(jīng)和衣(yī)服。若(ruò)沾(zhān)染皮(pí)膚(fū),眼(yǎn)睛時,要用大量清水或(huò)者生(shēng)理鹽水衝洗。
5.洗(xǐ)脫(tuō)液EB不(bù)含(hán)有整(zhěng)合劑EDTA,不影(yǐng)響下遊酶切,連接(jiē)等(děng)反應。也可(kě)以使用水洗(xǐ)脫,但應該(gāi)確保(bǎo)批(pī)pH大於(yú)7.5,pH過低影響(xiǎng)洗脫效(xiào)率(shuài)。用水洗脫DNA應(yīng)該保存在-20℃。DNA如(rú)果需(xū)要(yào)長(cháng)期保存,可以用TE緩衝液洗(10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH8.0),但是(shì)EDTA可(kě)能影(yǐng)響下遊(yóu)酶切反應,使用時(shí)可(kě)以適(shì)當稀釋。