猴痘(dòu)病(bìng)毒檢測試劑盒(hé)的組合物由(yóu)一(yī)個(gè)引物對和一(yī)個(gè)探針(zhēn)組(zǔ)成(chéng)：引物(wù)對(duì)由序列表(biǎo)中(zhōng)序(xù)列1和序列(liè)2所(suǒ)示的(dí)兩(liǎng)條單鏈(liàn)DNA分子組成(chéng)：探(tàn)針的序(xù)列(liè)為(wéi)序列表中序(xù)列(liè)3。利(lì)用本發明所(suǒ)提供的NASBA試劑盒(hé)對(duì)猴(hóu)痘(dòu)病(bìng)毒進行檢(jiǎn)測
，具有操作簡便
，快速(sù)，特(tè)異的(dí)優點。本(běn)發(fā)明可快速(sù)篩查猴痘病毒(dú)
，對口岸輸(shū)入性疾病篩查(chá)具有重要(yào)意義
，為防御疾病的傳入(rù)做好技術(shù)支(zhī)撐和戰略儲備
，滿足當前衛(wèi)生(shēng)檢疫的需(xū)求。
 

　　猴痘(dòu)病毒(dú)檢測試劑(jì)盒檢測結果和判定標(biāo)準(zhǔn)：
 

　　試驗結(jié)果成立(lì)的條件(jiàn)：陽性對照(zhào)PCR反(fǎn)應(yīng)產物電泳後在301bp的位置(zhì)上出(chū)現特(tè)異(yì)性條帶；陰性對照PCR產物電泳後(hòu)沒(méi)有(yǒu)條(tiáo)帶
，試驗結(jié)果(guǒ)成立(lì)
，否則結果不(bù)成立(lì)。
 

　　結果判(pàn)斷：在試驗(yàn)結(jié)果(guǒ)成(chéng)立的前提下
，如果樣品PCR反應(yīng)有特(tè)異(yì)性(xìng)的條帶
，則(zé)樣品(pǐn)為陽性(xìng)；反之(zhī)
，為(wéi)陰(yīn)性。
 

　　猴痘病(bìng)毒(dú)檢測(cè)試(shì)劑盒性(xìng)能(néng)檢(jiǎn)測：
 

　　1.PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒的重復性(xìng)檢測(cè)對(duì)同(tóng)一批提取的猴(hóu)痘(dòu)病(bìng)毒(dú)陽性模(mó)板進行10次(cì)PCR擴增
，觀(guān)察試劑(jì)盒對(duì)同一批次(cì)陽性(xìng)模板擴增(zēng)的結果。對10批提(tí)取(qǔ)的猴痘(dòu)病(bìng)毒(dú)陽性模(mó)板進行PCR擴增
，觀(guān)察試(shì)劑盒對(duì)不(bù)同批(pī)次提取(qǔ)的(dí)陽(yáng)性模板(bǎn)擴(kuò)增的(dí)結果(guǒ)。
 

　　2.PCR檢測試(shì)劑盒的穩(wěn)定(dìng)性檢測用配(pèi)製好的檢(jiǎn)測試劑盒(hé)分裝後(hòu)保存在-20℃冰(bīng)箱中
，每(měi)隔7d對陽(yáng)性模板進行PCR檢測
，連(lián)續(xù)檢測(cè)6個月(yuè)
，觀(guān)察試(shì)劑(jì)盒在-20℃保(bǎo)存的穩(wěn)定(dìng)性。用配(pèi)製好的(dí)PCR反應混合(hé)物分裝後分別保(bǎo)存在4℃冰箱或室(shì)溫(wēn)中(zhōng)
，每隔12h對陽性(xìng)模(mó)板(bǎn)進行PCR檢測
，連續(xù)檢測4d
，觀察(chá)試(shì)劑盒在(zài)室(shì)溫或4℃保存(cún)的(dí)穩(wěn)定性(xìng)。用配(pèi)製好的PCR反應混合(hé)物(wù)分(fēn)裝後(hòu)保(bǎo)存在-20℃冰(bīng)箱後
，分別(bié)凍融1~10次後
，對陽性模板進行PCR檢測
，觀(guān)察(chá)凍融次數對(duì)試劑盒的影(yǐng)響(xiǎng)。