Elastin 彈性蛋白/膠(jiāo)原(yuán)酶是廣泛(fàn)應(yīng)用的(dí)消化劑，胰蛋白酶(méi)是一(yī)種胰髒(zàng)製品,對蛋(dàn)白(bái)質有水(shuǐ)介作用,主要(yào)作用(yòng)於賴氨酸或精氨酸相(xiāng)連接的肽鍵,使細胞(bāo)間質(zhì)中(zhōng)的蛋(dàn)白(bái)質(zhì)水介而(ér)使細胞(bāo)分散開,在(zài)常(cháng)用的(dí)蛋白酶中由(yóu)於產(chǎn)品(pǐn)的(dí)活(huó)力和純度(dù)不(bù)同,對細胞的(dí)消(xiāo)化能力(lì)也(yě)不(bù)同(tóng),胰蛋白酶對(duì)細胞的作(zuò)用(yòng),取決(jué)於細(xì)胞類(lèi)型，酶(méi)的活力，配(pèi)製(zhì)的濃(nóng)度(dù)，消化的溫度，無(wú)機(jī)鹽(yán)離子，pH以(yǐ)及消(xiāo)化時間的長(cháng)短等。
 

　　是一(yī)種從細(xì)菌中提取出來的酶,對膠原(yuán)有很強的(dí)消(xiāo)化(huà)作用(yòng)，適於(yú)消(xiāo)化纖維(wéi)性組(zǔ)織(zhī)，上(shàng)皮(pí)組織(zhī)以及(jí)癌(ái)組織,它對細胞間(jiān)質(zhì)有(yǒu)較好(hǎo)的消化作(zuò)用(yòng),對細(xì)胞本身影(yǐng)響(xiǎng)不大(dà),可使細胞(bāo)與(yǔ)膠原(yuán)成分脫離(lí)而不受(shòu)傷(shāng)害，該酶分離(lí)效果(guǒ)好(hǎo),即使有鈣，鎂離(lí)子(zǐ)存(cún)在仍有(yǒu)活性,故可用PBS和(hé)含(hán)血清(qīng)的培(péi)養(yǎng)液配(pèi)製,即(jí)操作簡(jiǎn)便又(yòu)可提(tí)高細胞(bāo)成活率,濃度(dù)200u/mL或(huò)0，0，3mg/mL，此酶消(xiāo)化作用(yòng)緩和,無需機(jī)械振(zhèn)蕩(dàng),但膠原(yuán)酶價(jià)格較高,大量(liáng)使(shǐ)用(yòng)將(jiāng)增(zēng)加實(shí)驗成本(běn)。
 

　　Elastin 彈性蛋(dàn)白/膠(jiāo)原酶的(dí)具體操作方(fāng)法如下：
 

　　①在剪(jiǎn)斷連(lián)接(jiē)嬰(yīng)兒端和母(mǔ)親的臍帶(dài)後，立(lì)刻用(yòng)臍帶夾夾(jiā)住(zhù)，防止(zhǐ)內部(bù)汙染。裝(zhuāng)入無(wú)菌(jūn)袋(容器)中(zhōng)，送進(jìn)實驗(yàn)室。
 

　　②在生物(wù)安(ān)全櫃或(huò)超(chāo)淨工作(zuò)台內(nèi)，取(qǔ)出臍帶，連同(tóng)臍(qí)帶夾(jiā)用75%的酒(jiǔ)精泡2min(50ml離心(xīn)管(guǎn)或(huò)250px皿)。如果臍(qí)帶(dài)較(jiào)長(cháng)，無(wú)法裝入容器，可(kě)以(yǐ)把臍帶(dài)剪成250px左(zuǒ)右(yòu)，但(dàn)是剪(jiǎn)斷(duàn)之前一(yī)定(dìng)要用臍(qí)帶(dài)夾(jiā)加好(hǎo)，防(fáng)止(zhǐ)酒精進(jìn)入臍(qí)帶內部，損(sǔn)傷(shāng)細(xì)胞。
 

　　③用(yòng)酒(jiǔ)精(jīng)處(chǔ)理完，迅速移(yí)入裝有PBS或(huò)生理鹽(yán)水的容器中浸泡清洗(xǐ)2次，每(měi)次2min即(jí)可。
 

　　④剪掉臍帶(dài)夾(jiā)，把臍帶(dài)剪成2-75px段，用(yòng)剪(jiǎn)刀(dāo)從臍(qí)靜(jìng)脈內(nèi)側(cè)剖(pōu)開(kāi)臍帶(dài)，用(yòng)帶(dài)齒鑷(niè)子(臍帶(dài)組(zǔ)織(zhī)比(bǐ)較(jiào)滑，用帶齒鑷(niè)子好操作(zuò))把臍靜(jìng)脈(mài)，臍動脈(mài)以(yǐ)及臍帶包膜去除，防止(zhǐ)雜(zá)細(xì)胞混(hùn)入。
 

　　⑤用剪(jiǎn)刀剪(jiǎn)碎(suì)臍帶(dài)組(zǔ)織，0，1%Ⅱ型膠原(yuán)酶(méi)(稀(xī)釋液(yè)用(yòng)DMEM/F12)過(guò)夜消(xiāo)化，4℃過夜消化。