1.簡(jiǎn)介

CM SepFast 6HF Plus是一組(zǔ)弱陽(yáng)離(lí)子交換(huàn)介質。結合(hé)容(róng)量(liáng)和(hé)結合動力(lì)學(xué)高於IEX  SepFast  6HF係列。CM SepFast 6HF Plus 特別(bié)適用於需(xū)要(yào)增(zēng)加結(jié)合能(néng)力的(dí)生物分子的一(yī)般(bān)大(dà)規(guī)模純化。

CM SepFast 6HF Plus 在配體密度(dù)，負載量(liáng)和單個(gè)組(zǔ)分的分離能力之間(jiān)進行了平衡設計(jì)，適用於(yú)大(dà)規(guī)模生(shēng)物(wù)製造應用。

CM SepFast 6HF Plus的基(jī)質(zhì)由高度交聯的 6%瓊(qióng)脂糖和葡(pú)聚糖製(zhì)成(chéng)，具有優異(yì)的(dí)流(liú)動性(xìng)。它對生(shēng)物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學條件(jiàn)都(dū)非常(cháng)穩定。

2.產品特性(xìng)

表1  CM SepFast 6HF Plus的(dí)特(tè)性(xìng)

*測試條(tiáo)件：10  mM緩衝(chōng)液(yè) pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋白(bái)質，停(tíng)留(liú)時(shí)間5分(fēn)鐘，50%穿(chuān)透。

**在(zài) 32  mm內徑(jìng)色(sè)譜柱中，床(chuáng)高(gāo) 15 cm，室(shì)溫下用(yòng)水測(cè)量。

圖(tú)1 IEX  SepFast  Media的(dí)壓力-流(liú)動特性(xìng)

（備(bèi)注：將基礎基質填(tián)充(chōng)到32 mm內(nèi)徑的柱子中，最(zuì)終床⾼為15 cm。流(liú)動(dòng)相是(shì)去(qù)離子(zǐ)水(shuǐ)。測(cè)試在(zài)室(shì)溫下(xià)進(jìn)行）

圖2 滴(dī)定(dìng)曲(qū)綫

3.方法優(yōu)化

建議在載量(liáng)，流速(sù)，結合pH值，結合(hé)離子強度，洗(xǐ)脫(tuō)速度和梯(tī)度(dù)等參數之間進(jìn)行篩選(xuǎn)。由於(yú)CM SepFast 6HF Plus的快(kuài)速孔隙可(kě)及(jí)性，結(jié)合步(bù)驟(zhòu)可以在比洗脫(tuō)步(bù)驟更快的(dí)流速(sù)下(xià)完成。建(jiàn)議(yì)特(tè)別注意優(yōu)化洗(xǐ)脫(tuō)條(tiáo)件(jiàn)以獲得最(zuì)佳(jiā)分離(lí)能力(lì)。

強離子交換介質(zhì)可(kě)以(yǐ)在(zài)較寬的pH範(fàn)圍內(nèi)保(bǎo)持其(qí)電(diàn)荷(hé)（並因此保(bǎo)持(chí)其(qí)功(gōng)能），而弱離子(zǐ)交(jiāo)換(huàn)介質(zhì)的離(lí)解(jiě)程度和離(lí)子交(jiāo)換容(róng)量(liáng)隨(suí)pH值(zhí)而變化。因此(cǐ)，如果(guǒ)使(shǐ)用(yòng)弱(ruò)離(lí)子交換介質，優化(huà)pH值更(gēng)為關鍵(jiàn)。

通常，在(zài)優化(huà)方(fāng)法時(shí)，平衡組分(fēn)分離度(dù)與工藝產量(liáng)是主要考慮(lǜ)因(yīn)素(sù)。此外，對於不(bù)穩(wěn)定或對剪(jiǎn)切力敏感(gǎn)分子的純化，需要優(yōu)化操作(zuò)條件以平(píng)衡產量(liáng)和對(duì)目標(biāo)分子(zǐ)可(kě)能(néng)造(zào)成的(dí)損(sǔn)害。

4.裝柱

CM SepFast 6HF Plus由高度(dù)交聯(lián)的(dí)珠(zhū)狀瓊(qióng)脂糖製成(chéng)，具有(yǒu)出色(sè)的機械(xiè)強度。該(gāi)介質(zhì)可(kě)以(yǐ)很容易地以任(rèn)何可能(néng)的(dí)填(tián)充方式填充到任何類(lèi)型(xíng)的色譜柱中。典型(xíng)的(dí)包裝(zhuāng)壓力高(gāo)達3 bar。

5.保養

根(gēn)據不同(tóng)的(dí)應用(yòng)，介質(zhì)可(kě)能會(huì)被多(duō)次使用。如(rú)需(xū)重(zhòng)復(fù)使用(yòng)，請(qǐng)參閱以下(xià)說明(míng)。

（1）再生(shēng)

每(měi)次運(yùn)行後，用(yòng)高離(lí)子強度(dù)溶(róng)液(yè)（例(lì)如1M NaCl緩衝(chōng)液）或增(zēng)加pH 值(zhí)。

（2）就地清(qīng)洗(xǐ)  (CIP)

CIP是一種(zhǒng)去除(chú)強結(jié)合物質(zhì)的程序，例(lì)如再(zài)生(shēng)後殘留在吸(xī)附劑表麵(miàn)的脂(zhī)質，內(nèi)毒素(sù)和(hé)變(biàn)性蛋(dàn)白(bái)質。定期 CIP 可防止汙(wū)染物在(zài)填(tián)充(chōng)床中(zhōng)積聚，並有助(zhù)於保持(chí)色譜(pǔ)柱(zhù)性能。

應根據存在(zài)的(dí)汙(wū)染物(wù)類型(xíng)為(wéi)每個過程(chéng)製定具(jù)體的 CIP程序。CIP 的頻(pín)率取(qǔ)決(jué)於(yú)各個(gè)應用的(dí)性質(zhì)。

以下(xià)信(xìn)息可作(zuò)為(wéi)一(yī)般(bān)指(zhǐ)導(dǎo)：濃(nóng)度(dù)高達2 M的鹽可(kě)用(yòng)於(yú)清除因離子相互(hù)作用而(ér)結合(hé)的雜(zá)質。疏(shū)水性結合(hé)的汙(wū)染(rǎn)物(wù)可以通(tōng)過(guò)以下試(shì)劑(jì)去除(chú)：1 M NaOH，低比例的非離子洗滌劑（例(lì)如(rú)0.1-2%），鹼性(xìng)或酸性(xìng)條(tiáo)件下的(dí)30%  異(yì)丙(bǐng)醇（例(lì)如在乙酸或(huò)磷酸存(cún)在下）。也(yě)可(kě)以探索(suǒ)上(shàng)述試劑(jì)的組(zǔ)合(hé)。一般來(lái)說，孵(fū)育時間(jiān)應(yīng)該(gāi)更長(cháng)（例如(rú)從 30 min到2 h），以(yǐ)確保(bǎo)汙染物WAN全(quán)解離(lí)。

（3）消(xiāo)毒(dú)

建議使(shǐ)用接觸時(shí)間(jiān)為(wéi)1 h的(dí)0.5‑1.0 M NaOH進(jìn)行消(xiāo)毒。

6.儲存

CM SepFast 6HF Plus應儲存在20%乙醇中（強(qiáng)陽離子(zǐ)交(jiāo)換介質(zhì)含有(yǒu)0.2 M NaAC）以防(fáng)止(zhǐ)微生物(wù)生長(cháng)。將介(jiè)質存儲在(zài)4℃到(dào)30℃的溫度下。使用前(qián)，用至(zhì)少5床(chuáng)體(tǐ)積的運行緩(huǎn)衝液(yè)來平衡(héng)介質(zhì)。

7.更(gēng)多信息

了解(jiě)更多(duō)關(guān)於(yú)BioToolomics產(chǎn)品代(dài)理(lǐ)信息聯係天津益(yì)元利康(kāng)科技有(yǒu)限公(gōng)司(sī)。 

8.訂購(gòu)信息