1.簡(jiǎn)介(jiè)

CM SepFast 6HF是(shì)一(yī)組弱(ruò)陽(yáng)離(lí)子(zǐ)交換介質。該離(lí)子交(jiāo)換層析介質(zhì)特別(bié)適用(yòng)於(yú)生物分子的一般(bān)大規(guī)模純化(huà)，其中不純(chún)組分與(yǔ)目標(biāo)分子(zǐ)層析分離(lí)。

CM SepFast 6HF在配體(tǐ)密度，負載量(liáng)和單個組分的分離(lí)能力之間(jiān)進行了平衡設(shè)計(jì)，適用於(yú)大(dà)規(guī)模生物製造應用。

CM SepFast 6HF的(dí)基(jī)質(zhì)由(yóu)高(gāo)度交(jiāo)聯(lián)的 6%瓊脂糖製成，具(jù)有優(yōu)異(yì)的(dí)流動性(xìng)。它對生(shēng)物加工(gōng)行業中(zhōng)遇(yù)到(dào)的(dí)大多(duō)數(shù)化學(xué)條(tiáo)件都非常(cháng)穩定(dìng)。

2. 產品特性

表1 CM SepFast 6HF的(dí)特性

*測(cè)試(shì)條(tiáo)件：10  mM緩(huǎn)衝液(yè) pH  7.5，上(shàng)樣5 mg/ml 蛋(dàn)白質，停(tíng)留時間(jiān)5分(fēn)鐘，50%穿透。

**在(zài) 32  mm內(nèi)徑色譜柱(zhù)中(zhōng)，床高(gāo) 15 cm，室溫下(xià)用(yòng)水(shuǐ)測量。

圖1 IEX  SepFast  Media的(dí)壓力-流動(dòng)特性(xìng)

（備注：將基(jī)礎(chǔ)基質(zhì)填充到(dào)32 mm內(nèi)徑(jìng)的柱子中，最終床⾼為15 cm。流動相是去離(lí)子水(shuǐ)。測(cè)試(shì)在室溫(wēn)下進行）

圖2 滴定曲綫

3.方法(fǎ)優(yōu)化

建議在(zài)載量，流(liú)速，結合(hé)pH值(zhí)，結(jié)合離(lí)子(zǐ)強度(dù)，洗脫速(sù)度和梯度等(děng)參(cān)數(shù)之間(jiān)進(jìn)行篩選。由於(yú)CM SepFast 6HF的快(kuài)速(sù)孔隙可及(jí)性(xìng)，結(jié)合(hé)步驟可以在比洗(xǐ)脫(tuō)步(bù)驟(zhòu)更(gēng)快的流速下(xià)完成(chéng)。建(jiàn)議(yì)特(tè)別(bié)注意優化洗(xǐ)脫條件(jiàn)以獲得最佳分離(lí)能(néng)力。

強(qiáng)離子(zǐ)交換介(jiè)質可以在較寬的pH範圍內保持其電荷（並因(yīn)此保持(chí)其(qí)功能），而弱離(lí)子(zǐ)交換(huàn)介質的(dí)離解程度(dù)和(hé)離(lí)子(zǐ)交(jiāo)換容(róng)量(liáng)隨(suí)pH值而變(biàn)化。因(yīn)此，如果(guǒ)使(shǐ)用(yòng)弱離(lí)子交換(huàn)介(jiè)質(zhì)，優(yōu)化pH值更為關鍵(jiàn)。

通常在(zài)優化方(fāng)法時，平衡(héng)組(zǔ)分(fēn)分離度(dù)與(yǔ)工(gōng)藝產(chǎn)量是(shì)主要(yào)考(kǎo)慮(lǜ)因素(sù)。此外，對(duì)於不穩定或對(duì)剪(jiǎn)切(qiē)力(lì)敏感(gǎn)分(fēn)子的純化，需(xū)要(yào)優(yōu)化操(cāo)作(zuò)條(tiáo)件以(yǐ)平(píng)衡(héng)產量和(hé)對(duì)目標分(fēn)子(zǐ)可(kě)能(néng)造成的損害(hài)。

4.裝(zhuāng)柱

CM SepFast 6HF由高(gāo)度(dù)交聯的珠(zhū)狀(zhuàng)瓊脂糖製成(chéng)，具有(yǒu)出色(sè)的(dí)機(jī)械強(qiáng)度(dù)。該(gāi)介(jiè)質(zhì)可(kě)以很容(róng)易地(dì)以任何(hé)可能的填充(chōng)方(fāng)式(shì)填(tián)充(chōng)到(dào)任(rèn)何類型(xíng)的(dí)色(sè)譜柱(zhù)中。典型(xíng)的(dí)包(bāo)裝(zhuāng)壓(yā)力高(gāo)達(dá)3 bar。

5.保養(yǎng)

根(gēn)據不同的應用(yòng)，介質可能(néng)會被(bèi)多次使用。如需(xū)重復(fù)使(shǐ)用，請(qǐng)參閱以下(xià)說明。

（1）再(zài)生

每次運行(háng)後(hòu)，用(yòng)高(gāo)離(lí)子(zǐ)強(qiáng)度溶液（例(lì)如(rú)1M NaCl緩衝液）或(huò)增(zēng)加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是(shì)一(yī)種去除(chú)強結合(hé)物(wù)質(zhì)的程序，例如(rú)再(zài)生後(hòu)殘(cán)留在(zài)吸(xī)附(fù)劑表(biǎo)麵的(dí)脂質(zhì)，內毒(dú)素(sù)和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止汙(wū)染(rǎn)物在(zài)填充床(chuáng)中積聚，並(bìng)有助(zhù)於保持色譜(pǔ)柱性能(néng)。

應根據存在(zài)的汙染物類型為每個過(guò)程(chéng)製定具體的(dí) CIP程(chéng)序(xù)。CIP 的頻率取決(jué)於(yú)各個應用的(dí)性(xìng)質(zhì)。

以下信(xìn)息可作為一(yī)般(bān)指(zhǐ)導。

濃(nóng)度高達2 M的(dí)鹽(yán)可用於清(qīng)除因離子相互作用而(ér)結合的雜質(zhì)。疏(shū)水性(xìng)結(jié)合(hé)的(dí)汙染物可(kě)以(yǐ)通(tōng)過以下(xià)試劑(jì)去除：1 M NaOH，低比例的非離(lí)子洗滌劑（例(lì)如0.1-2%），鹼(jiǎn)性(xìng)或(huò)酸性(xìng)條件(jiàn)下(xià)的30%  異(yì)丙(bǐng)醇（例如(rú)在乙(yǐ)酸(suān)或(huò)磷(lín)酸存在下(xià)）。也可(kě)以探(tàn)索上述(shù)試劑(jì)的組合。一(yī)般來說(shuō)，孵(fū)育(yù)時(shí)間(jiān)應(yīng)該更長（例如(rú)從(cóng) 30 min到2 h），以(yǐ)確保汙染物WAN全解離。

（3）消(xiāo)毒(dú)

建(jiàn)議使用(yòng)0.5‑1.0 M NaOH接(jiē)觸1 h進(jìn)行(háng)消毒(dú)。

6.儲(chǔ)存

CM SepFast 6HF應儲(chǔ)存在20%乙醇(chún)中(zhōng)（強(qiáng)陽離(lí)子交換介(jiè)質(zhì)含(hán)有(yǒu)0.2 M NaAC）以防(fáng)止微生物生長。將介質存儲在(zài)4℃到(dào)30℃的溫(wēn)度下。使用前，用(yòng)至少5倍(bèi)體積的(dí)運行緩衝(chōng)液(yè)來平衡(héng)介質(zhì)。

7.更多信息(xī)

了解(jiě)更多關(guān)於(yú)BioToolomics產(chǎn)品代理信(xìn)息請(qǐng)聯係(xì)天(tiān)津(jīn)益元(yuán)利(lì)康(kāng)科(kē)技有(yǒu)限(xiàn)公司(sī)。 

8.訂(dìng)購信息