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更新時間(jiān):2023-08-21
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Q-PCR 和 RT-PCR 都是(shì)分子生(shēng)物學中(zhōng)常用的(dí)技術(shù),用於檢測和定(dìng)量特(tè)定(dìng)的核(hé)酸序(xù)列(liè)。Q-pcr 和 RT-pcr 有(yǒu)啥(shá)區別?它(tā)們(mén)的(dí)原理和(hé)應用(yòng)類型相(xiāng)同(tóng)嗎(má)?今(jīn)天(tiān)讓我們(mén)一起來了解一下(xià)吧(bā)!

一,Q-pcr 和 RT-pcr原(yuán)理上的不同(tóng)
Q-PCR 也(yě)是基於 PCR 的技術,但它引入了熒光(guāng)探(tàn)針或(huò)熒(yíng)光染(rǎn)料(liào)來(lái)實時監測(cè) PCR 反(fǎn)應(yīng)的進程。熒(yíng)光信(xìn)號的(dí)強度與(yǔ)目(mù)標序列(liè)的(dí)數(shù)量成正比(bǐ),因此可以(yǐ)定(dìng)量地(dì)測量(liáng)起(qǐ)始(shǐ)樣品(pǐn)中的(dí)目標(biāo)核酸(suān)數(shù)量(liáng)。
RT-PCR 結(jié)合了逆轉(zhuǎn)錄(Reverse Transcription)和聚合(hé)酶鏈式反應(PCR)的過(guò)程。
二(èr),Q-pcr 和(hé) RT-pcr應用上的不(bù)同
Q-PCR 主要用(yòng)於(yú)定量(liáng)目(mù)標 DNA 或 cDNA 的數量。它可以用於病毒載量,基(jī)因表達水平(píng),拷(kǎo)貝數(shù)變(biàn)異等(děng)研究。
RT-PCR 主要用(yòng)於(yú)檢(jiǎn)測和定量 RNA 分(fēn)子,通常用於(yú)研究(jiū)基因表達,病(bìng)毒載(zǎi)量等。
三,實(shí)驗方式上的不同選擇方(fāng)式(shì)
如果(guǒ)你關心的是目(mù)標 RNA 的表達水(shuǐ)平,比(bǐ)如研究基(jī)因(yīn)表達(dá),檢測(cè)特定的非(fēi)編碼(mǎ) RNA 等(děng),你應該選(xuǎn)擇(zé) RT-PCR。
如(rú)果(guǒ)你(nǐ)需要定(dìng)量(liáng) DNA 或 cDNA 的(dí)數量,比如測(cè)量病毒載量(liáng),檢測(cè)基因(yīn)拷貝數(shù)變(biàn)異等,你應該選(xuǎn)擇 Q-PCR。
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