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當前(qián)位(wèi)置:首(shǒu)頁技(jì)術(shù)文章(zhāng)WB實驗中(zhōng)條帶(dài)不跑歪(wāi)的秘訣

WB實(shí)驗中(zhōng)條(tiáo)帶(dài)不跑歪(wāi)的秘訣(jué)

更(gēng)新時間:2023-08-21點擊(jī)次數:3615

在(zài)做 Western blot 實(shí)驗(yàn)時,你(nǐ)一(yī)定會(huì)遇(yù)到(dào)各式各(gè)樣(yàng)的條(tiáo)帶,最(zuì)常見的就是條帶跑歪了,如(rú)凹型(xíng)條(tiáo)帶,凸(tū)型(xíng)條(tiáo)帶,斜(xié)條帶,條帶拖尾等。如何更好的做好(hǎo)WB實驗,讓我(wǒ)們一起(qǐ)來看看WB實驗中條帶不跑(pǎo)歪的秘(mì)訣吧!

一(yī),凹(āo)凸條帶的(dí)原因和解決辦法(fǎ)

可能原(yuán)因:可(kě)能是由(yóu)於(yú)膠未配好(hǎo)(凝膠(jiāo)未(wèi)能(néng)wan聚(jù)合,膠中(zhōng)有(yǒu)顆(kē)粒(lì)或(huò)氣(qì)泡(pào),凝膠(jiāo)未冷(lěng)卻好,),也(yě)可(kě)能(néng)是電(diàn)壓(yā)過高(gāo)。

解(jiě)決方法(fǎ):正(zhèng)確添(tiān)加質量合(hé)格(gé)且(qiě)未過期的 AP 及(jí) TEMED;過濾配膠(jiāo)的試劑(jì)保證(zhèng)配(pèi)膠(jiāo)過(guò)程(chéng)中膠內無氣泡;凝(níng)膠(jiāo)冷卻好後再上(shàng)樣;降(jiàng)低電壓。

二(èr),條(tiáo)帶出(chū)現黑點或(huò)黑(hēi)斑的原因和解(jiě)決辦(bàn)法

可(kě)能(néng)原(yuán)因(yīn):試(shì)劑汙染,抗(kàng)體結(jié)合(hé)到(dào)封閉(bì)劑。

解(jiě)決方法:使用(yòng)新(xīn)鮮配(pèi)置的(dí)試劑;過(guò)濾(lǜ)封閉液(yè);選用其他(tā)類型(xíng)封閉(bì)液。

三,條帶中出(chū)現邊緣規(guī)則(zé)的白圈的(dí)原(yuán)因和解決辦法

可(kě)能(néng)原因(yīn):轉膜(mó)時膜(mó)和膠中(zhōng)間有(yǒu)氣泡(pào),或抗體在膜上未(wèi)均匀(yún)分散。

解(jiě)決方(fāng)法:製(zhì)備轉(zhuǎn)膜凝(níng)膠(jiāo)時(shí)用(yòng)玻(bō)棒趕去氣泡;使(shǐ)用搖床(chuáng)孵(fū)育抗(kàng)體。

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