ELISA的原(yuán)理(lǐ)是以免疫(yì)學反應為(wéi)基(jī)礎
，將抗原(yuán)，抗(kàng)體的(dí)特(tè)異(yì)性反(fǎn)應與(yǔ)酶(méi)對底物的高效(xiào)催(cuī)化(huà)作用相結合(hé)起(qǐ)來的(dí)一(yī)種敏(mǐn)感(gǎn)性(xìng)很(hěn)高的(dí)試(shì)驗技術
。在(zài)實(shí)際(jì)應用中
，通過(guò)不同的(dí)設計
，具體的(dí)方法步驟(zhòu)可(kě)有(yǒu)多(duō)種
。那(nà)麼(mó)你知道(dào)夾心(xīn)法與競爭法的ELISA檢(jiǎn)測(cè)原(yuán)理是(shì)什麼嗎(má)？讓我(wǒ)們一起來看(kàn)看吧！

一，夾(jiā)心(xīn)法原理(lǐ)

夾心(xīn)法(fǎ)使(shǐ)用(yòng)的是(shì)兩個(gè)抗體(tǐ)夾抗原或者兩(liǎng)個(gè)抗原夾(jiā)抗體的方法
，這種復合物被稱之(zhī)為(wéi)三明治夾心結構
，利(lì)用一(yī)對配(pèi)對wan全的抗體(tǐ)
，可(kě)以特異(yì)性檢測抗(kàng)原
，當然主(zhǔ)要(yào)針(zhēn)對的是(shì)具(jù)有(yǒu)至少2個以(yǐ)上抗原(yuán)表(biǎo)位的抗原(yuán)
，抗體(tǐ)的配對(duì)可是門(mén)技術(shù)活
，很多公(gōng)司(sī)可以(yǐ)生產(chǎn)抗體(tǐ)
，但是配對卻很少(shǎo)做(zuò)
，主(zhǔ)要原因(yīn)在(zài)於篩(shāi)選(xuǎn)的(dí)難(nán)度
，可能開發(fā)的(dí)幾十(shí)株(zhū)針(zhēn)對同(tóng)一抗原的抗體
，都(dū)很難有一(yī)對合(hé)適(shì)的可以配對
，原(yuán)因(yīn)是(shì)多方(fāng)麵的
，有抗(kàng)原的表位(wèi)，構(gòu)象等原(yuán)因
，也(yě)有抗體(tǐ)效價的(dí)原(yuán)因
，當然(rán)還有篩(shāi)選(xuǎn)成(chéng)本的原因(yīn)
，所(suǒ)以每一個ELISA試(shì)劑盒(hé)都是經(jīng)過(guò)多(duō)次(cì)和(hé)長期的驗(yàn)證得來的(dí)
。

二，競爭法(fǎ)原理(lǐ)

競(jìng)爭法的使(shǐ)用(yòng)相對(duì)來說就窄(zhǎi)一點了
，其(qí)原(yuán)理是利(lì)用(yòng)抗(kàng)原抗體結合的(dí)可(kě)逆(nì)性
，但在(zài)合(hé)適濃(nóng)度時(shí)又可(kě)達(dá)到結合和解(jiě)離的穩定期(qī)
，那麼(mó)親和力(lì)更強的(dí)抗(kàng)體(tǐ)自然就能更有(yǒu)效的結合抗原了(liǎo)
。一(yī)般結(jié)合的解(jiě)離(lí)使用最(zuì)多的就是(shì)SPR和BLI技(jì)術(shù)了
，可以(yǐ)高精度或高通量的測抗(kàng)原(yuán)/抗(kàng)體(tǐ)，受(shòu)體/配體(tǐ)的(dí)親和力
。

利用(yòng)已知(zhī)的抗(kàng)原進(jìn)行標記（抗原A）
，作為對照(zhào)
，實驗(yàn)組加入樣(yàng)本（抗(kàng)原(yuán)B）及標(biāo)記抗原
，與對照組相比
，顯色(sè)低
，則該抗(kàng)原A與抗(kàng)原B競(jìng)爭(zhēng)結合(hé)抗體
，這種方(fāng)法(fǎ)一般用(yòng)於(yú)抗原材(cái)料中(zhōng)的幹擾物(wù)質(zhì)不易除去(qù)
，或不(bù)易得(dé)到足夠(gòu)的純(chún)化抗(kàng)原
。

包被抗(kàng)體(tǐ)進行競爭法呢
，一般用於(yú)ADA
，競(jìng)爭，非競(jìng)爭(zhēng)抗(kàng)體鑒定/篩(shāi)選
，抗體的(dí)競爭篩選是(shì)有效的免疫(yì)原性(xìng)檢測(cè)手段(duàn)之(zhī)一(yī)
。

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