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更(gēng)新時間(jiān):2023-10-18
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支(zhī)原體是目前(qián)為(wéi)止發(fā)現(xiàn)的最小的原(yuán)核生物,支(zhī)原(yuán)體汙(wū)染一般在顯微鏡下(xià)不可(kě)見(jiàn),很難察(chá)覺,但細(xì)胞會受到(dào)極大的(dí)損傷(shāng),主(zhǔ)要(yào)通過(guò)以(yǐ)下(xià)途徑影(yǐng)響(xiǎng)細胞(bāo)生(shēng)長及(jí)功(gōng)能。那麼(mó)細(xì)胞(bāo)被支原體汙染(rǎn),該怎(zěn)麼(mó)辦(bàn)呢?讓我們(mén)一(yī)起來看(kàn)看(kàn)吧(bā)!
一(yī),支原體汙(wū)染(rǎn)的來(lái)源(yuán)
1. 環(huán)境汙染(rǎn):如(rú)細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)房,細(xì)胞(bāo)培養箱,超淨(jìng)工(gōng)作台(tái)內已被支原體汙(wū)染;
2. 實驗器(qì)材的(dí)汙染(rǎn):移(yí)液槍(qiāng),移(yí)液管,細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)皿(mǐn),水(shuǐ)浴(yù)鍋等;
3. 細(xì)胞(bāo)培養試(shì)劑的(dí)汙(wū)染:培養(yǎng)基,胰酶(méi),血清,細(xì)胞(bāo)凍(dòng)存液(yè)等(děng);
二,處理方(fāng)法
1. 及時更換培養液(yè):可(kě)以減(jiǎn)緩支原體的汙染,但不能(néng)wan全(quán)清除;
2. 使(shǐ)用抗(kàng)生素(sù)類(lèi)去除(chú)試劑(jì):抗(kàng)生素對(duì)支原(yuán)體有(yǒu)較好(hǎo)的抑製(zhì)作用(yòng),可(kě)以有效(xiào)清(qīng)除(chú)支(zhī)原體(tǐ),但(dàn)長(cháng)時間使用(yòng)抗生素(sù),會(huì)產生耐藥(yào)性的風(fēng)險。在使(shǐ)用單(dān)一抗生(shēng)素(sù)清除效果(guǒ)不(bù)佳時(shí),可以考(kǎo)慮更換(huàn)抗(kàng)生素(sù)或者采(cǎi)用(yòng)復(fù)合型抗生素試劑;
3. 使用非(fēi)抗生素去(qù)除試劑(jì):非(fēi)抗生素(sù)清除試劑(jì)不(bù)會產(chǎn)生(shēng)耐藥性,對(duì)支(zhī)原體的(dí)清除(chú)效(xiào)果(guǒ)可以達到(dào)100%,且(qiě)幾乎對細(xì)胞沒有(yǒu)影響(xiǎng),是(shì)去(qù)除支(zhī)原體(tǐ)的(dí)shou選試(shì)劑。
4. 實驗室(shì)環境清潔:發生支原(yuán)體汙(wū)染後,應(yīng)及時(shí)處理已(yǐ)被汙染(rǎn)的(dí)細胞(bāo),並(bìng)對細(xì)胞房進行che底(dǐ)的(dí)清(qīng)潔(jié)和消殺(shā),防(fáng)止交(jiāo)叉汙染。
三,預防(fáng)方法(fǎ)
1. 定期(qī)消毒(dú):定(dìng)期(qī)對細胞房(fáng),實(shí)驗(yàn)服,移液槍(qiāng),細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)箱等(děng)進行消毒,及(jí)時清(qīng)除(chú)支原(yuán)體;
2. 檢(jiǎn)查細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)試劑:選擇來源(yuán)可靠(kào)的(dí)試劑及耗(hào)材產(chǎn)品,在(zài)進(jìn)行細(xì)胞培(péi)養(yǎng)操(cāo)作(zuò)之前,檢查細胞培養(yǎng)基,血清,胰酶(méi)等試(shì)劑(jì),可選擇合適孔(kǒng)徑的濾膜進(jìn)行(háng)過(guò)濾除菌,使用過程中(zhōng)如(rú)發(fā)現有(yǒu)汙(wū)染應及(jí)時更換(huàn);
3. 規範(fàn)細(xì)胞(bāo)培(péi)養(yǎng)操(cāo)作:建立良(liáng)好的(dí)細胞培(péi)養(yǎng)操(cāo)作SOP,遵循無菌(jūn)操作原(yuán)則,規範(fàn)穿戴實驗(yàn)服,口罩,手(shǒu)套等,並在(zài)細胞(bāo)培養(yǎng)開始(shǐ)時進行(háng)消(xiāo)毒;規範(fàn)處理(lǐ)實驗廢棄(qì)物(wù);
4. 在培養(yǎng)基中加(jiā)入支原(yuán)體預(yù)防試劑(jì):
加入抑(yì)製支(zhī)原體DNA合成(chéng)的抗生素(sù):例(lì)如氟喹(kuí)諾酮類(lèi)抗(kàng)生(shēng)素;
加入抑製(zhì)支原(yuán)體蛋白(bái)質合成(chéng)的(dí)抗生(shēng)素:例(lì)如(rú)大環(huán)內酯類,四(sì)環素,雙萜(tiē)烯(xī)類(lèi)等抗(kàng)生素;
加入非抗生(shēng)素(sù)類(lèi)支原(yuán)體清(qīng)除(chú)試(shì)劑:如膜活性多(duō)肽,通過與支原(yuán)體(tǐ)膜特(tè)異(yì)性結(jié)合che底(dǐ)清除支原體。
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