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不(bù)同(tóng)化(huà)學(xué)轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)點與缺點是什(shí)麼?
更新時(shí)間:2023-11-13
點擊次數:1615
化學法(fǎ)轉染(rǎn)技術已(yǐ)廣泛(fàn)應用於(yú)細胞的(dí)穩(wěn)定或瞬時(shí)轉染,那(nà)麼你(nǐ)知(zhī)道不(bù)同化學轉染(rǎn)方(fāng)法(fǎ)的優(yōu)點(diǎn)與缺點是(shì)什(shí)麼嗎?讓(ràng)我們一(yī)起(qǐ)來看看吧(bā)!
一(yī),陽離(lí)子(zǐ)脂質(zhì)體(tǐ)
優點(diǎn):
1.操(cāo)作快速(sù)簡單(dān)。
2.結果可重復(fù)。
3.轉(zhuǎn)染(rǎn)效率高(gāo)。
4.可(kě)轉染DNA,RNA和(hé)蛋白質(zhì)。
5.適用於生產(chǎn)瞬(shùn)時(shí)和(hé)穩定的(dí)蛋白質。
6.可(kě)用(yòng)於(yú)體內轉染。
缺點:
1.需進(jìn)行條件優化(huà)(一(yī)些細胞(bāo)係對陽離子脂質(zhì)體(tǐ)較敏(mǐn)感(gǎn))。
2.有些(xiē)細胞(bāo)係不容易轉(zhuǎn)染。
3.血清的存(cún)在幹擾復合物的(dí)形(xíng)成,導致低轉染效率(shuài)。
4.培(péi)養(yǎng)基中(zhōng)血(xiě)清的缺失會增加細(xì)胞毒(dú)性。
二,磷酸鈣共(gòng)沉澱
優點(diǎn):
1.便(biàn)宜(yí)且(qiě)容(róng)易獲(huò)得。
2.適(shì)用(yòng)於(yú)生產瞬時(shí)和穩(wěn)定的蛋白(bái)質。
3.轉(zhuǎn)染(rǎn)效(xiào)率高(gāo)(不(bù)限製細(xì)胞(bāo)係)。
缺(quē)點:
1.需(xū)要仔細製備試劑(jì) – CaPO4溶(róng)液對(duì)pH,溫度(dù)和緩(huǎn)衝鹽濃度(dù)的變(biàn)化敏感。2.可重復性(xìng)較差(chà)。
3.有細(xì)胞毒性,尤(yóu)其對(duì)原代(dài)細(xì)胞(bāo)。
4.不能(néng)采用(yòng)RPMI培養(yǎng)基,由於其(qí)含高濃(nóng)度的磷(lín)酸鹽。
5.不適(shì)用於動(dòng)物(wù)體(tǐ)內(nèi)轉染(rǎn)。
三,葡聚糖:
優(yōu)點:
1.操作簡單(dān)。
2.結(jié)果(guǒ)可(kě)重(zhòng)復。
3.便(biàn)宜。
缺點(diǎn):
1.對某(mǒu)些細胞有(yǒu)化(huà)學毒性。
2.隻(zhī)限(xiàn)於(yú)瞬(shùn)時轉染(rǎn)。
3.轉(zhuǎn)染效率低(dī),尤其(qí)在原(yuán)代細(xì)胞中(zhōng)。
四,其他陽(yáng)離(lí)子聚合(hé)物
優點:
1.在血清中穩定,對(duì)溫度(dù)不敏感。
2.高轉染效率(shuài)(限製細胞係(xì))。
3.結(jié)果可(kě)重(zhòng)復(fù)。
缺(quē)點:
1.對(duì)某(mǒu)些細(xì)胞(bāo)有(yǒu)毒(dú)性。
2.不能(néng)生物降(jiàng)解(樹(shù)枝狀大分(fēn)子)。
3.隻限(xiàn)於瞬時(shí)轉染。
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