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中(zhōng)科(kē)百(bǎi)抗(kàng)Neptry胰酶細(xì)胞消化(huà)液的(dí)應用與注意事項
更新(xīn)時(shí)間(jiān):2024-01-16
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細胞培養技術對於(yú)生產病毒(dú)性疫苗(miáo)和(hé)其他生物技術(shù)產品至關(guān)重(zhòng)要。細胞傳代是細胞(bāo)培養bi不可少的過程(chéng),對於貼(tiē)壁(bì)細(xì)胞(bāo),傳(chuán)代時(shí)首先(xiān)需進(jìn)行(háng)細(xì)胞(bāo)分離。胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)(胰酶)是常(cháng)用的消(xiāo)化(huà)酶,可使細胞間(jiān)的蛋白(bái)質(zhì)水解(jiě)從而(ér)使細(xì)胞(bāo)離散(sàn)。胰酶(méi)可在胰腺(xiàn)中大(dà)量(liáng)獲得,且(qiě)易(yì)提純,因(yīn)此在(zài)各(gè)種細(xì)胞(bāo)培養過程(chéng)中(zhōng)得(dé)到(dào)廣泛(fàn)應(yīng)用。那麼(mó)你(nǐ)知道(dào)中(zhōng)科(kē)百抗Neptry胰(yí)酶(méi)細(xì)胞(bāo)消化(huà)液的應(yīng)用與注(zhù)意(yì)事項(xiàng)有(yǒu)什(shí)麼嗎(má)?讓(ràng)我們(mén)一(yī)起(qǐ)來看(kàn)看吧(bā)!
中(zhōng)科(kē)百抗(kàng)NeptryTM消化液是一種(zhǒng)胰蛋(dàn)白酶(méi)類(lèi)似(sì)物(wù)(Trypsin Like Enzyme),是(shì)一種通過(guò)生(shēng)物工程(chéng)製備的(dí)非動物(wù)源性重(zhòng)組蛋(dàn)白(bái)酶,與(yǔ)胰(yí)蛋白酶有相(xiāng)似(sì)的(dí)解(jiě)離動力(lì)學,穩(wěn)定(dìng)性(xìng)更(gēng)高(gāo),純度(dù)更好,消(xiāo)化更(gēng)溫和,細(xì)胞毒性更低(dī)。目前主(zhǔ)要應用於(yú)細胞(bāo)培養(yǎng)中,可(kě)以在(zài)賴氨酸(suān)和(hé)精氨(ān)酸(suān)的(dí)C末端切割(gē)肽鍵(jiàn),可以(yǐ)替(tì)代(dài)豬或(huò)牛胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(Trypsin)對貼壁細胞(bāo)的消化解離(lí)。生(shēng)物製(zhì)藥(yào)中(zhōng),GMP級(jí)別(bié)的NeptryTM能(néng)夠(gòu)為疫(yì)苗生產,病毒載體(tǐ)生(shēng)產提供高質量(liáng)和高性價(jià)比(bǐ)的(dí)貼壁細(xì)胞消化(huà)解(jiě)決方案。
NeptryTM消(xiāo)化液(yè)與(yǔ)胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)具(jù)有(yǒu)類(lèi)似的功能,由大腸(cháng)杆(gān)菌(E.coli)重組表(biǎo)達,GMP條件生產(chǎn),在(zài)性能(néng)和(hé)儲(chǔ)存上(shàng)可wan全(quán)替代傳(chuán)統(tǒng)動物源(yuán)胰(yí)酶,讓細胞(bāo)消(xiāo)化更加高效便(biàn)捷。產(chǎn)品主要應用(yòng)方向:
1.用於(yú)組織(zhī)塊的消化解離和(hé)原代(dài)細(xì)胞(bāo)的獲(huò)取;
2.用於貼壁細胞(bāo)的(dí)傳(chuán)代消化和收(shōu)獲;
3.用於微載體方(fāng)法培養的細(xì)胞消化和收獲(huò);
4.用於(yú)疫苗(miáo)生(shēng)產(chǎn)過(guò)程(chéng)中一(yī)些(xiē)貼壁(bì)宿(sù)主細胞的消化,低血(xiě)清或無血(xiě)清的環境下(xià),弱(ruò)貼壁細(xì)胞及幹細胞(bāo)在傳(chuán)代(dài)過(guò)程中的消化(huà)。
使用Neptry消化液注(zhù)意事(shì)項(xiàng):
1.在使用過(guò)程(chéng)中注意避(bì)免消(xiāo)化(huà)液被(bèi)細菌汙染;
2.消(xiāo)化的時(shí)間(jiān)不宜過(guò)長(cháng),否(fǒu)則細(xì)胞(bāo)鋪板後(hòu)生長狀況(kuàng)會較(jiào)差(chà),做(zuò)流式時(shí)的(dí)CD Marker也會下降(jiàng);
3.消(xiāo)化液進行分裝時需分(fēn)裝成多瓶,並遵守3次左右用(yòng)完和(hé)隻裝2/3體積的原則(zé)。;
4.在低血清或無血清(qīng)的(dí)環(huán)境下,弱貼壁(bì)細(xì)胞(bāo)及幹(gān)細胞(bāo)在傳代(dài)過程中(zhōng)的消化效(xiào)果主(zhǔ)要取(qǔ)決於(yú)pH值,溫度,消化液濃(nóng)度(dù),組織(zhī)塊(kuài)大小(xiǎo)和(hé)硬度。
5.酚(fēn)紅在培養(yǎng)基中被用(yòng)來(lái)作為PH值(zhí)的(dí)指(zhǐ)示劑,中(zhōng)性(xìng)時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色(sè),鹼(jiǎn)性時為(wéi)紫(zǐ)色。研究表(biǎo)明酚(fēn)紅可以(yǐ)模(mó)擬固(gù)醇類激素的作用,為避(bì)免固醇類反應,培(péi)養(yǎng)細(xì)胞特別(bié)是哺乳(rǔ)類細(xì)胞時,需用不加(jiā)酚(fēn)紅的(dí)培(péi)養基。
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