南京(jīng)建成丙氨(ān)酸氨(ān)基轉(zhuǎn)移(yí)酶測(cè)試(shì)盒微板(bǎn)法(C009-2-1)現(xiàn)貨(huò)供應(yīng)

更新時(shí)間(jiān)：2024-04-11

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產品(pǐn)名稱：南京建(jiàn)成丙氨酸氨基轉移酶(méi)測試盒(hé)微板法(fǎ)(C009-2-1)現貨(huò)供應

產品貨(huò)號：C009-2-1

產品品(pǐn)牌(pái)：南(nán)京建成(chéng)

產品(pǐn)規格：96T

操作過程：

1，樣(yàng)本(běn)前處理(lǐ):

①，血(xiě)清（漿(jiāng)）及其(qí)它液(yè)體(tǐ)樣本待測(cè)：直(zhí)接(jiē)測(cè)定(dìng)。

②，動物(wù)組(zǔ)織(zhī)樣本：準確稱(chēng)取(qǔ)組(zǔ)織重量，按(àn)重(zhòng)量（g）：體(tǐ)積 (mL)=1:9 的比(bǐ)例，加(jiā)入(rù) 9 倍體積的生(shēng)理(lǐ)鹽水，冰(bīng)水浴條件下機械匀(yún)漿，2500 轉(zhuǎn)/分(fēn)，離(lí)心(xīn) 10 分(fēn)鐘，取(qǔ)上清液(yè)待測。

③，培(péi)養細胞樣本(běn)前處理：將收集(jí)好的(dí)細(xì)胞(bāo)用(yòng)等滲(shèn)緩衝液（推薦 0.1mol/L pH7～7.4 磷(lín)酸(suān)鹽緩(huǎn)衝液或(huò)生(shēng)理(lǐ)鹽水(shuǐ)）清洗 1～ 2 次；1000 轉(zhuǎn)/分,離(lí)心 10 分鐘,棄上清,留(liú)細(xì)胞沉澱，加(jiā)入匀漿介(jiè)質（推(tuī)薦加入(rù) 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸鹽(yán)緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)或生(shēng) 理(lǐ)鹽水），冰水(shuǐ)浴(yù)條(tiáo)件(jiàn)下超聲(shēng)破(pò)碎(suì)或手(shǒu)動(dòng)匀(yún)漿(jiāng)，製備好的匀(yún)漿(jiāng)液不(bù)離心，待(dài)測。

2，操作(zuò)表(biǎo)：

	測(cè)定孔	對照孔(kǒng)
基質(zhì)液(yè)（μL）37℃已預溫	20	20
待(dài)測樣(yàng)本（μL）	5
37℃反(fǎn)應(yīng) 30 分鐘(zhōng) (測(cè)定孔每吸取一個(gè)樣本(běn)，將(jiāng)吸嘴(zuǐ)伸入孔板(bǎn)底部(bù)基(jī)質(zhì)液中(zhōng)，反復吸(xī)打混匀,但(dàn)注(zhù)意不要吸入氣泡(pào))
2，4—*肼(jǐng)液（μL）	20	20
待(dài)測(cè)樣本（μL）		5
37℃反(fǎn)應(yīng) 20 分鐘 (對照孔(kǒng)每吸取一(yī)個樣(yàng)本，將吸(xī)嘴伸入孔板(bǎn)底部液體中，反(fǎn) 復(fù)吸打混(hùn)匀(yún), 但(dàn)注意(yì)不要吸入氣泡)
0.4mol/L *液(yè)（μL）	200	200
輕輕水平搖動 96 孔板(bǎn)混匀，室(shì)溫放置 15 分鐘，波長(cháng) 510nm，酶(méi)標(biāo)儀測(cè)定(dìng)各孔 OD 值(zhí)，以(yǐ)絕對(duì) OD 值(測(cè)定(dìng)孔 OD 值(zhí)減(jiǎn)去對照(zhào)孔 OD 值），查標準曲綫(xiàn)，求得相(xiāng)應的(dí) ALT/GPT 活(huó)力(lì)單位。

注意事(shì)項：

1，比色法(fǎ)中常用的(dí)有(yǒu)賴氏（Reitman-Frankel）法及(jí)金(jīn)氏（King）法(fǎ)。賴(lài)氏法(fǎ)標(biāo)準曲綫所(suǒ)定(dìng)單位(wèi)數(shù)，是用實(shí)驗方法(fǎ)和卡門氏(shì)分(fēn)光光度(dù)法（速(sù)率法）作(zuò)對(duì)比(bǐ)測定求得的。以(yǐ)卡(qiǎ)門氏(shì)單(dān)位報(bào)告結果，比較準(zhǔn)確。卡(qiǎ)門(mén)氏單位定義：1mL 液(yè)體，反(fǎn)應液總(zǒng)容量3mL，波(bō)長340nm，1cm 光(guāng)徑，25℃，1min 內(nèi)所生(shēng)成的(dí)丙酮酸，使NADH氧化成 NAD+而引起(qǐ)吸(xī)光(guāng)度每(měi)下(xià)降(jiàng)0.001 為一個單位（1卡(qiǎ)門氏單位=0.482 U/L，25℃）。

2，一般(bān)血(xiě)清(qīng)標本內源(yuán)性(xìng)酮酸很少，血清(qīng)對照(zhào)孔吸光度值(zhí)接(jiē)近試(shì)劑(jì)空(kōng)白孔(kǒng)（以雙蒸水(shuǐ)代替血清，其他和對照(zhào)孔同樣(yàng)操作）。所(suǒ)以(yǐ)，成批(pī)標(biāo)本(běn)測(cè)定時，一般(bān)不需(xū)要每(měi)一標(biāo)本都作本(běn)身血清(qīng)對(duì)照孔，以試(shì)劑(jì)空白孔代(dài)替(tì)即可，但對(duì)脂(zhī)血，黃疸或溶血(xiě)血清，每(měi)份標(biāo)本應作對照(zhào)孔。

3，酶(méi)活力超(chāo)過 150 卡門氏單(dān)位時(shí)，用生(shēng)理鹽水稀(xī)釋血清後(hòu)重測(cè)。

4，應將(jiāng)一般血(xiě)清的(dí)對照孔(kǒng)（或(huò)稱標(biāo)本(běn)空白(bái)孔(kǒng)）的(dí)吸光度作為日常(cháng)質控的指標之(zhī)一；如相差大，可考慮α-酮戊二(èr)酸(suān)濃度，DNPH濃度及儀器等(děng)原因(yīn)引(yǐn)起。

5，血(xiě)清中(zhōng) ALT 在室(shì)溫（25℃）可(kě)保(bǎo)存2 天(tiān)，在0～4℃可保(bǎo)存(cún)一周，在(zài)-25℃可保存 1 個(gè)月(yuè)。

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貨號	產品(pǐn)名(míng)稱	規格
C009-2-1	Alanine aminotransferase Assay Kit	96T

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