產品名稱：Elabscience小(xiǎo)鼠生長分化(huà)因子15(GDF15)ELISA試劑(jì)盒(E-EL-M0604)現貨(huò)供應(yīng)

產品貨號：E-EL-M0604

產(chǎn)品品牌：Elabscience

產品(pǐn)用(yòng)途：該(gāi)試劑盒用於體外定量(liáng)檢(jiǎn)測小鼠(shǔ)血清，血(xiě)漿(jiāng)或其(qí)它(tā)相關(guān)生物液體(tǐ)中GDF15濃度。

檢(jiǎn)測原(yuán)理(lǐ)：本(běn)試劑(jì)盒(hé)采(cǎi)用(yòng)雙抗體(tǐ)夾(jiā)心 ELISA 法。用(yòng)抗小鼠 GDF15 抗(kàng)體包(bāo)被(bèi)於(yú)酶(méi)標板上， 實驗時樣品（或(huò)標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)）中的小鼠(shǔ) GDF15 會(huì)與(yǔ)包(bāo)被抗體結合(hé)。後(hòu)依次加(jiā)入(rù)生 物(wù)素(sù)化(huà)的抗小鼠 GDF15 抗體(tǐ)和辣根過(guò)氧化物(wù)酶標(biāo)記的親(qīn)和(hé)素，抗小鼠 GDF15 抗體與結(jié)合在包(bāo)被(bèi)抗體(tǐ)上(shàng)的(dí)小(xiǎo)鼠 GDF15 結合，生(shēng)物素(sù)與親(qīn)和素(sù)特異性(xìng)結合而 形(xíng)成(chéng)免(miǎn)疫(yì)復合(hé)物，遊(yóu)離的成分被(bèi)洗去(qù)。加(jiā)入(rù)顯色底(dǐ)物(wù)(TMB)，TMB 在辣根過(guò) 氧化(huà)物酶的催(cuī)化(huà)下呈現藍色(sè)，加終止(zhǐ)液(yè)後變(biàn)成黃(huáng)色。用酶標儀(yí)在(zài) 450 nm 波長(cháng) 處測(cè) OD 值，GDF15 濃(nóng)度(dù)與(yǔ) OD450 值之間呈正比(bǐ)，通過繪製標準曲(qū)綫計(jì)算(suàn)出 樣(yàng)品中(zhōng) GDF15 的(dí)濃度(dù)。

注(zhù)意(yì)事項：

試(shì)劑(jì)盒注意事(shì)項：

1) 本(běn)試劑盒僅(jǐn)供體(tǐ)外研究使用，不(bù)用(yòng)於臨(lín)床(chuáng)診(zhěn)斷(duàn)。

2) 試(shì)驗(yàn)中請(qǐng)穿(chuān)著實(shí)驗服(fú)並(bìng)戴乳膠(jiāo)手(shǒu)套做(zuò)好防(fáng)護工作(zuò)。特(tè)別(bié)是(shì)檢測血液或(huò)者(zhě)其他體(tǐ)液樣(yàng)品(pǐn)時，請按(àn)國家生(shēng)物試(shì)驗室安全防護(hù)條(tiáo)例執(zhí)行。

3) 剛開啟的(dí)酶標板(bǎn)孔(kǒng)中可能會(huì)有少(shǎo)許水樣物(wù)質(zhì)，此為正常現象(xiàng)，不會對(duì)實驗(yàn)結果(guǒ)造(zào)成任何影(yǐng)響(xiǎng)。暫時(shí)不用的板(bǎn)條(tiáo)應拆卸(xiè)後(hòu)放入備(bèi)用鋁箔袋(dài)，按照(zhào)上述表(biǎo)格中保存(cún)條件存放。

4) 請勿(wù)重(zhòng)復使用已稀(xī)釋(shì)過(guò)的標準品(pǐn)，生物(wù)素(sù)化(huà)抗體工(gōng)作液(yè)，酶結(jié)合(hé)物工(gōng)作液(yè)。未(wèi)用(yòng)完的(dí)濃縮(suō)生物(wù)素化抗體(100×)，濃縮HRP酶結合物(wù)(100×)，酶(méi)標板及其他原液按照上述表格中保(bǎo)存條件存放。

5) 檢(jiǎn)測使用的酶(méi)標(biāo)儀需要(yào)安裝(zhuāng)能檢測(cè)450±2 nm波長的濾(lǜ)光片(piàn)，光(guāng)密度(dù)範圍在(zài)0-3.5之間。建議(yì)使(shǐ)用時(shí)提前15分(fēn)鐘預熱。

6) 請勿使用其他(tā)批號或(huò)其他(tā)來源的(dí)試劑(jì)混(hùn)合(hé)或替代本試劑(jì)盒中(zhōng)的(dí)試(shì)劑。

7) 試驗中(zhōng)所(suǒ)用的EP管(guǎn)和(hé)吸(xī)頭(tóu)均(jūn)為(wéi)一次性使(shǐ)用(yòng)，嚴禁(jīn)混用。

8) 請(qǐng)勿使(shǐ)用過期(qī)的(dí)試(shì)劑。n

樣品注意(yì)事(shì)項：

1) 收(shōu)集血液(yè)的試管(guǎn)應為一次(cì)性無內毒素試管。避免(miǎn)使(shǐ)用(yòng)溶血(xiě)，高血脂(zhī)樣品(pǐn)。

2) 樣品(pǐn)收(shōu)集(jí)後若在1周內進行(háng)檢測(cè)可保(bǎo)存於2-8℃，若不能及時檢(jiǎn)測，請(qǐng)按(àn)一(yī)次使用量分裝，凍存於(yú)-20℃(1個(gè)月內檢(jiǎn)測)，或-80℃(3個月內檢測)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。在檢(jiǎn)測前(qián)，冷(lěng)凍過的樣(yàng)本(běn)應(yīng)緩慢(màn)地融化並(bìng)離心(xīn)除去凍(dòng)融(róng)過程產生(shēng)的沉澱(diàn)物(wù)。室(shì)溫混(hùn)匀(yún)後使(shǐ)用。

3) 試(shì)劑盒檢(jiǎn)測範圍(wéi)不(bù)等(děng)同於(yú)樣(yàng)本(běn)中(zhōng)待(dài)測物的(dí)濃度範圍。如果樣品(pǐn)中(zhōng)待(dài)測物(wù)濃度(dù)過(guò)高(gāo)或過(guò)低，請對樣(yàng)本做適(shì)當(dāng)的(dí)稀釋或濃(nóng)縮。

4) 若所(suǒ)檢樣(yàng)本不在說明書(shū)所列樣(yàng)本之(zhī)中(zhōng)，建(jiàn)議做預(yù)實驗驗(yàn)證其檢測有效性。

5) 若(ruò)使用(yòng)化學(xué)裂(liè)解液(yè)製(zhì)備組織匀漿或細胞提(tí)取液(yè)，由於(yú)引(yǐn)入某些(xiē)化學物質會導致(zhì)ELISA測值出現(xiàn)偏差(chà)。

6) 某(mǒu)些重組蛋(dàn)白可能(néng)與(yǔ)試劑(jì)盒(hé)中(zhōng)捕(bǔ)獲或檢測抗體不匹配(pèi)而(ér)出現(xiàn)不能(néng)檢測(cè)的(dí)情況。

操(cāo)作步(bù)驟：

1. 分(fēn)別(bié)設(shè)定標準(zhǔn)孔(kǒng)，空(kōng)白(bái)孔(kǒng)和樣本孔(kǒng)。標準孔(kǒng)加(jiā)入(rù) 100 μL倍比(bǐ)稀釋的標準品，空(kōng)白(bái)孔加(jiā)入 100 μL 標準品&樣本稀釋(shì)液，其餘孔加入 100 μL 待(dài)測樣本(běn)(建議所(suǒ)有(yǒu)的(dí)待(dài)檢(jiǎn)樣本和標(biāo)準品在檢(jiǎn)測中設(shè)立復孔(kǒng)；建議通過預(yù)實驗(yàn)或咨詢(xún)技(jì)術(shù)支持確定(dìng)待檢樣本(běn)的稀(xī)釋(shì)倍數)。給酶(méi)標板覆(fù)膜，37℃孵(fū)育 90 分(fēn)鐘(zhōng)。提示：加樣時(shí)將樣(yàng)品加(jiā)於(yú)酶標(biāo)板(bǎn)底部(bù)，盡量不觸及孔(kǒng)壁，輕輕(qīng)晃動(dòng)混匀，避免產生氣泡。加(jiā)樣(yàng)時間宜控製在 10 分鐘(zhōng)內。

2. 甩盡(jìn)孔(kǒng)內(nèi)液體(tǐ)，不用(yòng)洗(xǐ)滌(dí)。每(měi)個孔中加入(rù)生物素化抗(kàng)體(tǐ)工(gōng)作(zuò)液 100 μL，酶(méi)標板(bǎn)加(jiā)上覆(fù)膜(mó)，37℃溫育 1 小(xiǎo)時。

3. 甩盡(jìn)孔內液體，在潔(jié)淨的吸水紙(zhǐ)上(shàng)拍幹。每孔加洗(xǐ)滌液(yè) 350 μL，浸泡 1 分(fēn)鐘(zhōng)，吸(xī)去(qù)或甩掉酶標板(bǎn)內的(dí)液(yè)體，拍幹。重復此洗(xǐ)板步驟 3 次。提示(shì)：此(cǐ)處(chǔ)與其他(tā)洗板步(bù)驟都可(kě)使(shǐ)用洗板機(jī)(參(cān)考(kǎo)北(běi)京拓普 DEM-3 型洗板(bǎn)機(jī)參(cān)數設置(zhì)：2 點(diǎn)吸，每(měi)孔加(jiā)入洗滌液(yè) 350 μL，振板(bǎn) 5 秒，吸液 0.5 秒)。洗(xǐ)板(bǎn)完成(chéng)後請立即進(jìn)行下步操(cāo)作(zuò)，不(bù)要(yào)讓微孔板(bǎn)幹燥。

4. 每孔(kǒng)加(jiā) HRP 酶(méi)結(jié)合(hé)物(wù)工作液(yè) 100 μL，酶(méi)標(biāo)板加上(shàng)覆膜，37℃溫育 30 分鐘。

5. 甩(shuǎi)盡孔內(nèi)液體(tǐ)，洗(xǐ)板 5 次(cì)，方(fāng)法(fǎ)同步驟 3。

6. 每孔(kǒng)加底物(wù)溶液(yè)(TMB)90 μL，酶標(biāo)板加(jiā)上覆膜(mó)，37℃避光孵育 15 分鐘(zhōng)左右。提示：根據實際顯色(sè)情況(kuàng)酌情(qíng)縮(suō)短或(huò)延長，但不可超過(guò) 30 分鐘。當(dāng)標(biāo)準孔出現明顯梯度時(shí)(前 4 個(gè)顯色孔出現明顯藍(lán)色梯度)，即可終(zhōng)止(zhǐ)。提(tí)前 15 分(fēn)鐘(zhōng)打(dǎ)開酶標(biāo)儀(yí)預(yù)熱。

7. 每孔加(jiā)終止(zhǐ)液 50 μL，終止反應。提示(shì)：終(zhōng)止液的加入順序應盡(jìn)量(liáng)與(yǔ)底(dǐ)物溶(róng)液(yè)的加(jiā)入順序(xù)相同(tóng)。

8. 立即(jí)用酶標儀(yí)在 450 nm 波長測(cè)量(liáng)各(gè)孔的光(guāng)密(mì)度(OD值(zhí))。

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