細(xì)胞轉染是(shì)指將(jiāng)外源性(xìng)基因導(dǎo)入到(dào)細(xì)胞內的技術(shù)
。那你知道細胞轉染(rǎn)是如(rú)何分(fēn)類(lèi)的嗎？讓我(wǒ)們一(yī)起來看看(kàn)吧(bā)！
 

　　一(yī)，根據(jù)導入(rù)的核酸存(cún)在(zài)於宿(sù)主細(xì)胞(bāo)的時間長短，可分為(wéi)瞬(shùn)時轉染(rǎn)和(hé)穩定轉(zhuǎn)染
。
 

　　瞬(shùn)時(shí)轉染(transient transfection)：指(zhǐ)將精心構(gòu)建(jiàn)的(dí)質(zhì)粒通(tōng)過一定方式導(dǎo)入(rù)哺乳動物細(xì)胞內，其(qí)中(zhōng)所(suǒ)攜(xié)帶(dài)的外源基(jī)因不與細胞內(nèi)基因組(zǔ)整合(hé)
。
 

　　細(xì)胞中(zhōng)外(wài)源基(jī)因(yīn)的瞬(shùn)時(shí)轉染(rǎn)表達時(shí)間(jiān)有(yǒu)限，通常僅持(chí)續(xù)數日(rì)，直至外(wài)源基因由(yóu)於細胞分裂過(guò)程(chéng)中的各種(zhǒng)因(yīn)素而喪失(shī)
。此方法常用(yòng)於(yú)啟(qǐ)動子(zǐ)和(hé)其他調控元件(jiàn)的(dí)研究
。
 

　　目(mù)前，憑借多(duō)種(zhǒng)轉染試(shì)劑(jì)的創新(xīn)，已(yǐ)能在哺(bǔ)乳動物細胞中(zhōng)實(shí)現(xiàn)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，以(yǐ)生產具有(yǒu)適當折疊(dié)和翻(fān)譯後(hòu)修(xiū)飾的重組(zǔ)蛋白
。
 

　　穩定(dìng)轉染(Stable transfected)：外源(yuán)DNA被(bèi)整合到細胞(bāo)基因組(zǔ)中或作為附(fù)加質(zhì)粒(lì)保留(liú)在(zài)細胞內(nèi)
。與(yǔ)瞬(shùn)時(shí)轉(zhuǎn)染(rǎn)不(bù)同，穩(wěn)定轉染(rǎn)能夠(gòu)與宿主基因(yīn)組整(zhěng)合(hé)，因(yīn)此轉染(rǎn)細胞及(jí)其後代(dài)細胞(bāo)的基因組(zǔ)中同時保留了轉(zhuǎn)染的DNA
。
 

　　由(yóu)於穩定轉染效(xiào)率(shuài)較低，因(yīn)此選擇有(yǒu)效的轉染策略(lüè)和(hé)篩選方法至關重(zhòng)要
。
 

　　二，根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可分為(wéi)化(huà)學(xué)，生物和(hé)物理方(fāng)法
。
 

　　細(xì)胞由帶(dài)有負(fù)電(diàn)荷的磷脂(zhī)雙(shuāng)分子層構(gòu)成(chéng)，對(duì)於(yú)大分子物(wù)質而言，其形成(chéng)了不可(kě)透(tòu)過的屏障(zhàng)，例如DNA和(hé)RNA的磷酸骨架，它(tā)們(mén)也帶有(yǒu)負電(diàn)荷(hé)
。為了讓(ràng)核(hé)酸(suān)穿(chuān)過細胞(bāo)膜，研究人員(yuán)開發了(liǎo)多種技術，大(dà)致分為(wéi)三類：
 

　　化學(xué)方法(fǎ)：利用載體(tǐ)分子(zǐ)包裹(guǒ)核酸，使(shǐ)其呈現中性(xìng)電(diàn)荷或(huò)正電荷
。例(lì)如(rú)陽離子(zǐ)脂(zhī)質體(tǐ)方(fāng)法(fǎ)，磷酸鈣共(gòng)沉澱法(fǎ)，其他(tā)陽離子(zǐ)物(wù)質介導(dǎo)等(děng)技術
。
 

　　生物(wù)方(fāng)法(fǎ)：利(lì)用(yòng)基因(yīn)工(gōng)程病毒(dú)將非病毒基(jī)因轉染至細(xì)胞中
。目前較常見的是各種(zhǒng)病(bìng)毒介導的轉染技(jì)術
。
 

　　物理方法：通過在細(xì)胞(bāo)膜表(biǎo)麵產(chǎn)生瞬時(shí)的孔(kǒng)道，導入(rù)DNA
。例(lì)如電(diàn)穿孔法，顯(xiǎn)微注(zhù)射法
。
 

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