流(liú)式細胞(bāo)分(fēn)選(xuǎn)抗(kàng)體是種(zhǒng)常用的細(xì)胞分選技(jì)術(shù)
，可以(yǐ)用於分離(lí)和純化復雜細胞(bāo)混合物(wù)中的不(bù)同細(xì)胞亞群(qún)。FACS主要基(jī)於流式細(xì)胞儀和細胞(bāo)表麵標(biāo)記(jì)的(dí)抗(kàng)體
，通(tōng)過(guò)細胞的(dí)免疫反(fǎn)應(yīng)來實(shí)現(xiàn)分(fēn)選(xuǎn)。
 

　　1.抗體選擇：抗體(tǐ)可(kě)以特(tè)異(yì)性地(dì)結合目標(biāo)細(xì)胞表(biǎo)麵的分子(zǐ)
，如受體(tǐ)，細胞(bāo)表麵蛋白等。選擇抗(kàng)體(tǐ)需(xū)要(yào)考慮到(dào)其特(tè)異(yì)性(xìng)，親(qīn)和(hé)性以(yǐ)及(jí)是(shì)否適(shì)用(yòng)於實(shí)驗(yàn)條件。
 

　　2.標記抗體(tǐ)：為(wéi)了(liǎo)識別(bié)目標(biāo)細胞(bāo)
，選擇的抗體需要標(biāo)記上(shàng)可檢測(cè)物質
，如熒光(guāng)染(rǎn)料(liào)。常用的標記(jì)物(wù)質(zhì)包括熒光染料，酶(méi)等。標(biāo)記(jì)抗(kàng)體(tǐ)的(dí)選擇需要確(què)保標記(jì)物可以被(bèi)流式細胞儀(yí)識(shí)別(bié)和檢測(cè)。
 

　　3.標記細胞：將(jiāng)抗體標記(jì)的(dí)目(mù)標(biāo)細胞與其(qí)他細胞(bāo)混(hùn)合(hé)
，形成細胞懸(xuán)浮液。通(tōng)過(guò)孵(fū)育(yù)
，讓抗體與細(xì)胞發生(shēng)特(tè)異(yì)性結合(hé)
，將目(mù)標細(xì)胞與(yǔ)其他(tā)細(xì)胞區分(fēn)開(kāi)來。
 

　　4.單細(xì)胞(bāo)懸浮(fú)：將(jiāng)標記後的細胞懸(xuán)浮(fú)液通過(guò)微細孔篩網
，使(shǐ)得(dé)細胞以(yǐ)單(dān)個細(xì)胞的形(xíng)式(shì)懸(xuán)浮(fú)在懸浮液中。這(zhè)樣能夠確保每(měi)個(gè)細胞的(dí)獨(dú)立(lì)性(xìng)
，使其(qí)能(néng)夠由(yóu)流式細胞(bāo)儀在分選過程中被(bèi)準確檢(jiǎn)測。
 

　　5.流(liú)式細(xì)胞儀檢測：將單(dān)個細(xì)胞懸浮液通(tōng)過(guò)流(liú)式細胞(bāo)儀
，儀器會(huì)以(yǐ)較(jiào)高(gāo)的速度將細(xì)胞一個接一個地(dì)通(tōng)過光(guāng)束(shù)
，同時(shí)檢(jiǎn)測(cè)每個(gè)細胞的(dí)熒光(guāng)信(xìn)號。根據抗體(tǐ)標(biāo)記的熒光信號的不同(tóng)
，可以確(què)定細胞的(dí)類(lèi)型和特征。
 

　　6.細胞分(fēn)選(xuǎn)：根據(jù)流式細(xì)胞儀(yí)檢(jiǎn)測(cè)到(dào)的熒光(guāng)信號
，將目(mù)標細胞(bāo)與(yǔ)非(fēi)目標細胞進(jìn)行區分(fēn)和分(fēn)選。流(liú)式細胞分(fēn)選(xuǎn)通(tōng)常根(gēn)據熒光(guāng)信號(hào)的強度(dù)來判斷細(xì)胞是(shì)否為目標(biāo)細(xì)胞(bāo)
，並根(gēn)據(jù)設定的參(cān)數(shù)進(jìn)行細(xì)胞的篩(shāi)選，分(fēn)選(xuǎn)和分(fēn)離。
 

　　7.細胞收集(jí)：經過(guò)分選(xuǎn)後(hòu)
，目標細胞會被分離和純化。通常(cháng)是(shì)通(tōng)過(guò)對(duì)視(shì)野內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行(háng)進一步分(fēn)選和收集(jí)
，可(kě)以使(shǐ)用電場(cháng)，壓力等(děng)手(shǒu)段(duàn)對(duì)細胞進(jìn)行(háng)進(jìn)一步分選(xuǎn)和(hé)排(pái)列(liè)。
 

　　總結起(qǐ)來(lái)
，流式細胞(bāo)分(fēn)選(xuǎn)抗(kàng)體(tǐ)原(yuán)理主(zhǔ)要(yào)包括(kuò)抗體(tǐ)選擇，抗(kàng)體標記，標記細胞，單(dān)細胞懸(xuán)浮(fú)，流式細胞儀檢測(cè)，細(xì)胞(bāo)分選和細胞(bāo)收(shōu)集等步驟(zhòu)。這些步(bù)驟的協同作用(yòng)可以(yǐ)選拔(bá)出(chū)特(tè)定目標(biāo)細(xì)胞並實現高純(chún)度的細胞分選(xuǎn)。