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產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)

產品(pǐn)簡(jiǎn)介
CHO細胞專用轉(zhuǎn)染試劑盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit,用於CHO細胞的(dí)高(gāo)密度無(wú)血清(qīng)懸浮(fú)培(péi)養(yǎng),DNA 瞬時轉染及蛋白(bái)表(biǎo)達。
產(chǎn)品分(fēn)類(lèi)
一,產品(pǐn)簡介(jiè)
CHO細(xì)胞(bāo)專(zhuān)用轉(zhuǎn)染(rǎn)試(shì)劑(jì)盒——PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit,是一(yī)款(kuǎn)高(gāo)效(xiào)經濟的(dí)核(hé)酸轉染試劑(jì),專(zhuān)門用(yòng)於(yú)在(zài)CHO懸浮細胞進行(háng)重 組蛋白(bái)生產的(dí)試劑盒,包(bāo)含轉染(rǎn)試劑(jì),稀釋液,無(wú)血(xiě)清(qīng)培(péi)養基,補(bǔ)料,增強(qiáng)劑等組(zǔ)分,具有(yǒu)操作簡(jiǎn)單,價格便宜, 蛋白產量(liáng)高(gāo)等優點(diǎn)。
PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit適用(yòng)範(fàn)圍:CHO細胞(bāo)的高密度(dù)無血(xiě)清(qīng)懸浮(fú)培(péi)養,DNA 瞬(shùn)時轉(zhuǎn)染及蛋白(bái)表(biǎo)達。
二,實驗(yàn)操作(zuò)流(liú)程(chéng)
1.細胞接種(以(yǐ)25mL體(tǐ)係為(wéi)例(lì)):
根據細胞狀(zhuàng)態,選(xuǎn)擇(zé)合適的接種(zhǒng)密(mì)度,建(jiàn)議接種密(mì)度(dù)為(wéi)2.5~3×106 cells/mL,待第(dì)二天(tiān)細胞(bāo)密(mì)度達(dá)到(dào)6×106 cells/mL左(zuǒ)右,活(huó)性(xìng)大於(yú)95%時(shí)進行轉(zhuǎn)染。
2.瞬時(shí)轉染:
建議質(zhì)粒(μg)與(yǔ)試劑(μL)參考(kǎo)配比區(qū)間為(wéi)1:2~1:4之間(jiān)。具體步驟如圖(tú)1所示(shì)(以1:3為(wéi)例(lì)):
(1)使用本(běn)樣(yàng)品前渦旋混(hùn)匀5秒(miǎo),使用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋(shì)75 μL的轉(zhuǎn)染試(shì)劑,並(bìng)吹(chuī)打均匀(yún);
(2)使(shǐ)用1.25 mL PolyTool™ CHO Medium稀釋(shì)25 μg質粒,並吹(chuī)打(dǎ)混(hùn)匀(yún);
(3)將(1)和(hé)(2)所述(shù)溶(róng)液混合均匀;
(4)將(jiāng)(3)所述混(hùn)合(hé)溶液室溫靜(jìng)置孵育(yù)10~15 min;
(5)將(jiāng)(4)中(zhōng)的(dí)復合(hé)物(wù)溶液加(jiā)入(rù)25 mL的(dí)細胞(bāo)培(péi)養體係中(zhōng),放回(huí)搖(yáo)床中,在(zài)37 ℃,震(zhèn)蕩速(sù)度120 rpm下(xià)繼(jì)續培養(yǎng)。
3.產物表達與(yǔ)檢(jiǎn)測(cè):
(1)轉(zhuǎn)染(rǎn)24小時,72小時,120小時,168小(xiǎo)時後加(jiā)入3%(0.75 mL/25 mL)PolyTool™ CHO S1補料(liào),0.3%(75 μL/25 mL)PolyTool™ CHO S2補料。
若想(xiǎng)獲得(dé)高表達效(xiào)果,24 小時(shí)添加完補(bǔ)料(liào)後(hòu),將細(xì)胞轉移至(zhì)32℃搖床(chuáng)培養(yǎng)箱中進行(háng)低溫表(biǎo)達(葡(pú)萄糖控製在(zài) 4~8 g/L)。
(2)轉(zhuǎn)染(rǎn)後(hòu)第(dì) 6~8 天測定產(chǎn)物表(biǎo)達量(liáng)。大(dà)多數(shù)蛋白(bái)的合成(chéng)在轉染後第7天左右(yòu)可(kě)達到(dào)最高(gāo)值(zhí),客(kè)戶(hù)可(kě)根據細胞(bāo)狀態及(jí)表達量(liáng)選擇(zé)適宜的收獲時間。

圖1 細胞(bāo)轉(zhuǎn)染示意圖(tú)
CHO細胞(bāo)專用轉染試(shì)劑(jì)盒PolyTool™ CHO-Fit Transfection Reagent Kit代(dài)理——天津益(yì)元利(lì)康(kāng)生(shēng)物(wù)科技有(yǒu)限公司(sī),成(chéng)立(lì)於2018年,坐(zuò)落於(yú)天津經濟(jì)技(jì)術開發區。公(gōng)司產品綫涉及細胞與基因治療,免(miǎn)疫學,分(fēn)子生物(wù)學,細胞(bāo)生物學(xué)等(děng)多(duō)個方向(xiàng),專注於生(shēng)命科學試劑,耗材(cái),細胞,儀器等(děng)產品銷售,經(jīng)營(yíng)的(dí)品(pǐn)牌(pái)主要(yào)有:ThermoFisher,Sigma,Qiagen,EZBioscience,ZYMO Research,MedKoo,Abcam等等。我們(mén)提供質優價(jià)美(měi)的產品,及時(shí)到位的(dí)服務(wù),努(nǔ)力成(chéng)長(cháng)為(wéi)生命科學(xué)和(hé)生物(wù)技術企業的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商(shāng)。

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