產(chǎn)品(pǐn)名稱：Elabscience人成纖維細(xì)胞生長因子FGF21 ELISA試劑(jì)盒(E-EL-H0074)現貨(huò)供應(yīng)

產(chǎn)品貨(huò)號：E-EL-H0074

產(chǎn)品品(pǐn)牌(pái)：Elabscience

產品用(yòng)途(tú)：該(gāi)試劑(jì)盒用(yòng)於體外定量檢(jiǎn)測(cè)人血(xiě)清，血漿或其它相(xiāng)關生物液體中(zhōng)FGF21濃度。

檢測(cè)原理：本試劑(jì)盒采用雙抗體(tǐ)夾心(xīn) ELISA 法(fǎ)。用抗(kàng)人(rén) FGF21 抗(kàng)體(tǐ)包被於(yú)酶(méi)標板上(shàng)，實驗時樣(yàng)品（或標準品(pǐn)）中的人 FGF21 會(huì)與(yǔ)包被(bèi)抗體(tǐ)結合。後依次(cì)加入生(shēng)物素(sù)化(huà)的(dí)抗人 FGF21 抗(kàng)體和(hé)辣根過(guò)氧化物酶標記(jì)的(dí)親和素(sù)，抗人 FGF21 抗(kàng)體與(yǔ)結合(hé)在(zài)包被抗體(tǐ)上(shàng)的人 FGF21 結(jié)合(hé)，生物(wù)素與親和素(sù)特異性(xìng)結合(hé)而形(xíng)成(chéng)免疫復合(hé)物，遊(yóu)離(lí)的成分被(bèi)洗去(qù)。加(jiā)入顯色(sè)底物(wù)(TMB)，TMB 在(zài)辣(là)根過氧(yǎng)化物酶的催化(huà)下呈(chéng)現藍色(sè)，加(jiā)終(zhōng)止(zhǐ)液(yè)後(hòu)變成(chéng)黃(huáng)色。用(yòng)酶標(biāo)儀在(zài) 450 nm 波(bō)長處(chǔ)測(cè) OD 值，FGF21 濃度(dù)與(yǔ) OD450 值之間(jiān)呈正比，通過(guò)繪(huì)製(zhì)標(biāo)準曲綫(xiàn)計(jì)算(suàn)出樣品中 FGF21 的濃度。

注意(yì)事項：

試劑盒注意事項(xiàng)：

1) 本試(shì)劑盒僅(jǐn)供體(tǐ)外研究使(shǐ)用(yòng)，不用於臨(lín)床診斷。

2) 試驗中(zhōng)請穿著實驗(yàn)服(fú)並(bìng)戴(dài)乳(rǔ)膠手套做(zuò)好防(fáng)護(hù)工作。特別是檢(jiǎn)測(cè)血液或者其(qí)他(tā)體(tǐ)液(yè)樣品時，請(qǐng)按國(guó)家(jiā)生物試驗(yàn)室(shì)安(ān)全(quán)防護條例執行。

3) 剛(gāng)開啟的酶標板孔(kǒng)中(zhōng)可能(néng)會(huì)有少許(xǔ)水(shuǐ)樣(yàng)物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會對實(shí)驗結果造(zào)成任何(hé)影響。暫(zàn)時(shí)不用的板條(tiáo)應(yīng)拆(chāi)卸(xiè)後(hòu)放入(rù)備用鋁箔袋(dài)，按照上述表(biǎo)格中(zhōng)保(bǎo)存(cún)條件存放。

4) 請勿重(zhòng)復(fù)使用已(yǐ)稀(xī)釋過的標準品(pǐn)，生物(wù)素(sù)化抗體(tǐ)工(gōng)作(zuò)液，酶結合物工作液(yè)。未用完的濃縮生物(wù)素化(huà)抗(kàng)體(100×)，濃縮HRP酶結合(hé)物(wù)(100×)，酶標板(bǎn)及其他(tā)原(yuán)液按照(zhào)上述表格中保存條(tiáo)件存放。

5) 檢(jiǎn)測(cè)使用的酶標儀需(xū)要安裝能檢(jiǎn)測450±2 nm波長的(dí)濾光(guāng)片，光(guāng)密(mì)度範圍在(zài)0-3.5之間。建議使用(yòng)時(shí)提(tí)前15分(fēn)鐘(zhōng)預熱(rè)。

6) 請勿使(shǐ)用(yòng)其他批號或其(qí)他來(lái)源(yuán)的試劑(jì)混合或替代本(běn)試劑盒中(zhōng)的試劑。

7) 試(shì)驗(yàn)中(zhōng)所用的EP管和吸頭均為一次(cì)性使用，嚴禁混(hùn)用。

8) 請勿(wù)使(shǐ)用(yòng)過期(qī)的試(shì)劑。n

樣品注意(yì)事項(xiàng)：

1) 收集血液的試(shì)管應(yīng)為一次性無(wú)內毒素試(shì)管(guǎn)。避免(miǎn)使用溶(róng)血，高(gāo)血脂樣品。

2) 樣(yàng)品(pǐn)收(shōu)集(jí)後若(ruò)在(zài)1周內(nèi)進(jìn)行檢(jiǎn)測可(kě)保(bǎo)存於2-8℃，若不(bù)能及(jí)時(shí)檢測(cè)，請按一次(cì)使用(yòng)量分(fēn)裝(zhuāng)，凍存(cún)於(yú)-20℃(1個月內檢(jiǎn)測(cè))，或-80℃(3個(gè)月(yuè)內(nèi)檢(jiǎn)測(cè))，避免(miǎn)反復(fù)凍融。在檢(jiǎn)測前(qián)，冷凍(dòng)過(guò)的(dí)樣(yàng)本應緩慢地(dì)融(róng)化並離心除去凍融過程產(chǎn)生(shēng)的(dí)沉澱物。室溫混匀後(hòu)使用。

3) 試劑盒檢(jiǎn)測範(fàn)圍不等同(tóng)於樣(yàng)本中待(dài)測物的濃(nóng)度(dù)範(fàn)圍。如(rú)果樣品中待(dài)測物濃(nóng)度(dù)過高或過(guò)低(dī)，請對樣本(běn)做適當的(dí)稀釋(shì)或(huò)濃(nóng)縮。

4) 若所(suǒ)檢(jiǎn)樣本不在說明(míng)書所列樣本(běn)之中(zhōng)，建議做預實(shí)驗驗(yàn)證其(qí)檢(jiǎn)測(cè)有效性。

5) 若(ruò)使用化學(xué)裂解(jiě)液(yè)製(zhì)備組(zǔ)織匀漿或細(xì)胞(bāo)提取液，由於引入(rù)某(mǒu)些(xiē)化(huà)學物質(zhì)會導(dǎo)致ELISA測(cè)值(zhí)出現偏差(chà)。

6) 某些(xiē)重組(zǔ)蛋白可能與試劑盒(hé)中(zhōng)捕(bǔ)獲或檢測抗體(tǐ)不(bù)匹(pǐ)配而(ér)出(chū)現不能(néng)檢(jiǎn)測的情況。

操作步(bù)驟(zhòu)：

1. 分別設定標(biāo)準(zhǔn)孔(kǒng)，空(kōng)白孔(kǒng)和樣本(běn)孔。標準孔(kǒng)加(jiā)入 100 μL倍比稀釋(shì)的標準品，空白(bái)孔加入(rù) 100 μL 標(biāo)準品&樣本稀釋液，其(qí)餘(yú)孔加(jiā)入(rù) 100 μL 待測樣本(建議所有的(dí)待(dài)檢(jiǎn)樣(yàng)本和標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)在檢測中(zhōng)設立(lì)復(fù)孔；建議通過(guò)預實驗(yàn)或(huò)咨(zī)詢(xún)技(jì)術支持(chí)確定待檢(jiǎn)樣(yàng)本的(dí)稀釋(shì)倍(bèi)數(shù))。給酶標(biāo)板(bǎn)覆(fù)膜，37℃孵(fū)育(yù) 90 分鐘。提(tí)示：加樣(yàng)時將(jiāng)樣品加於(yú)酶(méi)標板底部，盡量不觸及孔(kǒng)壁，輕(qīng)輕晃動混匀，避免(miǎn)產生(shēng)氣(qì)泡(pào)。加樣時(shí)間宜(yí)控(kòng)製(zhì)在 10 分(fēn)鐘(zhōng)內。

2. 甩盡孔(kǒng)內(nèi)液體，不用洗(xǐ)滌。每個孔中加入生(shēng)物(wù)素化(huà)抗體工作(zuò)液(yè) 100 μL，酶標板加上覆膜(mó)，37℃溫育 1 小(xiǎo)時。

3. 甩盡孔內(nèi)液體(tǐ)，在(zài)潔(jié)淨(jìng)的吸水紙上拍(pāi)幹(gān)。每孔加洗滌液 350 μL，浸泡 1 分鐘，吸去(qù)或甩掉(diào)酶標板內的液體，拍幹(gān)。重復(fù)此洗(xǐ)板步(bù)驟(zhòu) 3 次。提示(shì)：此處與(yǔ)其他洗板步驟都(dū)可(kě)使(shǐ)用洗板機(參考北京(jīng)拓普 DEM-3 型洗板機(jī)參數設(shè)置(zhì)：2 點吸(xī)，每(měi)孔加(jiā)入洗滌液(yè) 350 μL，振(zhèn)板 5 秒，吸(xī)液 0.5 秒(miǎo))。洗板完(wán)成(chéng)後請立(lì)即進行下步操作(zuò)，不(bù)要讓微孔板(bǎn)幹(gān)燥(zào)。

4. 每(měi)孔加(jiā) HRP 酶(méi)結合物(wù)工(gōng)作(zuò)液(yè) 100 μL，酶標板(bǎn)加上覆膜，37℃溫育(yù) 30 分(fēn)鐘。

5. 甩盡孔(kǒng)內液體，洗(xǐ)板(bǎn) 5 次，方(fāng)法同步驟(zhòu) 3。

6. 每(měi)孔(kǒng)加(jiā)底(dǐ)物(wù)溶(róng)液(TMB)90 μL，酶標(biāo)板加上(shàng)覆膜，37℃避光孵(fū)育(yù) 15 分鐘左(zuǒ)右(yòu)。提示(shì)：根(gēn)據實(shí)際(jì)顯色情況酌情(qíng)縮短或延(yán)長，但不可超(chāo)過(guò) 30 分鐘。當(dāng)標準(zhǔn)孔出(chū)現明顯梯度(dù)時(前 4 個顯(xiǎn)色(sè)孔出現明(míng)顯(xiǎn)藍色(sè)梯(tī)度)，即(jí)可(kě)終止。提(tí)前 15 分(fēn)鐘打開(kāi)酶(méi)標(biāo)儀預熱。

7. 每孔加(jiā)終止液 50 μL，終止(zhǐ)反應(yīng)。提(tí)示：終(zhōng)止液的加(jiā)入順(shùn)序應盡量與(yǔ)底(dǐ)物溶液的(dí)加入順(shùn)序相同。

8. 立即用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長測(cè)量各(gè)孔(kǒng)的光(guāng)密(mì)度(dù)(OD值)。

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