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  • RNA提取(qǔ)準備(bèi)工(gōng)作(zuò)及注意事(shì)項有什(shí)麼(mó)?

    2023-11-01 你知(zhī)道RNA提取準備工(gōng)作及(jí)注意事項都(dū)有(yǒu)什麼(mó)嗎(má)?讓我們(mén)一起(qǐ)來(lái)看看吧(bā)!一(yī),槍頭(tóu)和EP管(guǎn)等的消(xiāo)毒滅菌1.用(yòng)去(qù)離子(zǐ)水配製(zhì)0.1%(千(qiān)分(fēn)之(zhī)一(yī))的DEPC(劇毒物(wù)),須在(zài)通風櫥中小(xiǎo)心(xīn)使(shǐ)用(yòng),避光(guāng)密閉4℃保存(cún);DEPC水(shuǐ)是(shì)用DEPC處理過並經高溫高壓(yā)消毒的(dí)純(chún)水。經(jīng)檢測不(bù)含RNase,DNase和(hé)proteinase。2.將槍頭和EP管(guǎn)放入(rù)0.1%的(dí)DEPC內(nèi),保證槍頭和EP管內(nèi)都充滿0.1%的DEP。3.避(bì)光(guāng),靜(jìng)置(zhì),過(guò)夜(yè)(12-24h)4.裝(zhuāng)槍頭和(hé)EP管的盒子不(bù)需要用(yòng)DEPC浸(jìn)泡,將槍頭(tóu)或者(zhě)...
  • 如(rú)何配置培(péi)養(yǎng)基(jī)?

    2023-10-31 你知道該如何(hé)配置培養基嗎?讓(ràng)我們(mén)一起來(lái)看看吧!一,細胞實驗全(quán)程注(zhù)意事項(xiàng)1.無菌操(cāo)作是重中之重(zhòng),細胞(bāo)培養對無菌(jūn)條件(jiàn)比(bǐ)較(jiào)苛(kē)刻,實(shí)驗人在進(jìn)行(háng)整個(gè)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的(dí)無菌(jūn)意(yì)識一定(dìng)要(yào)強(qiáng),否則一個(gè)不小心,發生細菌汙染(rǎn),輕則浪(làng)費細胞,重(zhòng)則汙染整個培(péi)養(yǎng)箱(xiāng)。2.實驗人(rén)員進入細胞房前(qián)應(yīng)該(gāi)換(huàn)上幹(gān)淨的鞋(xié)子,白大褂(guà),手套(tào)和(hé)口(kǒu)罩。3.所有耗(hào)材放(fàng)入工作台(tái)前都需用75%酒(jiǔ)精進行(háng)消(xiāo)毒,雙手進入工作(zuò)台前(qián)也需(xū)要用75%的(dí)酒(jiǔ)精(jīng)進(jìn)行消毒。4.進行(háng)實(shí)驗前應先對(duì)工作台進行紫(zǐ)外滅菌30min以上(shàng),並將(jiāng)所(suǒ)有需要(yào)用(yòng)到的耗(hào)材(cái)放到工作台(tái)上一...
  • 如何選(xuǎn)擇合(hé)適的培(péi)養基(jī)?

    2023-10-31 培養細(xì)胞(bāo)的(dí)重(zhòng)要環(huán)節有很(hěn)多,其中很重(zhòng)要的一步(bù)就是為細胞(bāo)選擇適(shì)合(hé)的生長環(huán)境(jìng),為其(qí)選(xuǎn)擇成(chéng)分(fēn)適合又營(yíng)養豐(fēng)富的細胞培養(yǎng)基。細(xì)胞(bāo)培養基(jī)是(shì)供(gōng)給細(xì)胞營(yíng)養,維持細(xì)胞(bāo)生(shēng)長和(hé)增(zēng)殖的多(duō)種營(yíng)養物質(zhì)的(dí)混(hùn)合(hé)物,種(zhǒng)類一般包(bāo)括(kuò)經典(diǎn)/基(jī)礎(chǔ)培(péi)養基(jī),無(wú)血清(qīng)培(péi)養基以(yǐ)及化學成(chéng)分(fēn)確(què)定的(dí)培養基(jī)等。那麼該(gāi)如何選(xuǎn)擇合(hé)適的培養基(jī)呢?讓我(wǒ)們一(yī)起來(lái)看看吧!1.RPMI-1640培養基RPMI-1640廣泛(fàn)應(yīng)用於哺乳動物,特殊造血細胞(bāo),正(zhèng)常或惡(è)性增生(shēng)的白細(xì)胞,雜交(jiāo)瘤細(xì)胞的(dí)培(péi)養(yǎng),是(shì)目(mù)前應用十分廣泛的培養基。主(zhǔ)要(yào)用於懸(xuán)浮細(xì)胞培養。其(qí)它(tā)像K...
  • 影響WB實驗的(dí)因素(sù)有(yǒu)什麼(mó)?

    2023-10-30 WB實(shí)驗是分子生物(wù)學中(zhōng)最(zuì)為常見的(dí)實(shí)驗,那麼你知道(dào)影響(xiǎng)WB實(shí)驗(yàn)的因(yīn)素(sù)有(yǒu)什(shí)麼(mó)嗎?讓我(wǒ)們一起(qǐ)來看看(kàn)吧!一,蛋白樣(yàng)本(běn)製(zhì)備1.蛋(dàn)白質的樣品(pǐn)製(zhì)備(bèi)注意以(yǐ)下問題(tí):(1)在合適(shì)的條件(jiàn)下,保(bǎo)持(chí)蛋白質的最(zuì)大(dà)溶(róng)解性和可(kě)重復(fù)性。(2)選擇合(hé)適(shì)的(dí)表(biǎo)麵活(huó)性(xìng)劑和還(huán)原劑,使其形成各(gè)自多肽(tài)的(dí)溶(róng)液(yè)。(3)盡量(liáng)去(qù)除核酸,多糖(táng),脂類(lèi)等分子的幹擾,裂解(jiě)完畢(bì)離心之(zhī)後取(qǔ)中層澄(chéng)清溶液時避(bì)免吸(xī)到底層沉澱(diàn)和(hé)上層脂(zhī)類(lèi)。(4)整(zhěng)個製(zhì)作(zuò)蛋白樣本的製(zhì)備(bèi)過(guò)程(chéng)必(bì)須(xū)在低(dī)溫(wēn)下(xià)進(jìn)行(háng),避免(miǎn)細胞(bāo)破碎(suì)釋放出各種酶(méi)類,但是(shì)注(zhù)意不要(yào)反復(fù)凍融。(5)所抽(chōu)取(qǔ)樣(yàng)...
  • DMEM和(hé)1640培養(yǎng)基有哪些不(bù)同?

    2023-10-30 培(péi)養(yǎng)基(jī)有(yǒu)很多(duō)不(bù)同的名字(zì)是因(yīn)為(wéi)根據不同細(xì)胞的(dí)培養和應(yīng)用場景,培養(yǎng)基可以分為(wéi)多種類(lèi)型,最常見的是(shì)DMEM,RPMI-1640,MEM等(děng)。這些(xiē)培養(yǎng)基(jī)有(yǒu)自己的配方特(tè)點(diǎn)和適(shì)用範圍(wéi)。那麼你(nǐ)知道(dào)DMEM和(hé)1640培養基有哪些不同嗎?讓(ràng)我們一起來看看(kàn)吧(bā)!DMEM(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium)是一(yī)種zui廣泛應用(yòng)的(dí)細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)基之一(yī),它是由Eagle於(yú)1959年開(kāi)發出(chū)來的(dí),後由Dulbecco進行(háng)了(liǎo)改(gǎi)良。DMEM主要(yào)適用於(yú)肝髒(zàng),腎(shèn)髒(zàng),肺,心髒(zàng)等多(duō)種(zhǒng)類(lèi)型(xíng)的哺乳(rǔ)動物(wù)...
  • 細(xì)胞培養實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問題(tí)有(yǒu)哪(nǎ)些?

    2023-10-27 你(nǐ)知(zhī)道細胞培(péi)養實驗常(cháng)見問題有哪些嗎?讓我(wǒ)們(mén)一起(qǐ)來看(kàn)看吧!一(yī),細胞(bāo)汙染和感(gǎn)染的(dí)處(chǔ)理方法細(xì)菌汙(wū)染(rǎn):如(rú)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞(bāo)培(péi)養物(wù)出(chū)現(xiàn)混濁(zhuó)或(huò)異(yì)味(wèi),可(kě)能存(cún)在(zài)細(xì)菌汙染(rǎn)。立(lì)即停止(zhǐ)細胞(bāo)培(péi)養(yǎng),對細(xì)胞(bāo)培養器具(jù)進行嚴格的消(xiāo)毒和清潔(jié),更換(huàn)新的細胞培(péi)養物和培養基(jī)。真(zhēn)菌(jūn)汙染(rǎn):真(zhēn)菌汙染(rǎn)常(cháng)常(cháng)表現為細胞培(péi)養(yǎng)物(wù)表麵的(dí)白色或(huò)黑色(sè)斑點。細(xì)胞培(péi)養器具應(yīng)che底(dǐ)清潔,細(xì)胞培養物可以(yǐ)添加(jiā)抗真菌(jūn)劑(jì)來預防(fáng)和(hé)處理。細(xì)胞(bāo)病(bìng)毒感(gǎn)染:如(rú)發現細胞(bāo)培養物出現(xiàn)明顯的(dí)細(xì)胞(bāo)溶解和(hé)變形(xíng),可能(néng)存在細胞病(bìng)毒(dú)感(gǎn)染。可(kě)使用(yòng)抗病(bìng)du藥(yào)物來處理感(gǎn)染(rǎn),並且(qiě)進行核酸檢(jiǎn)測(cè)以...
  • 什麼是液(yè)體(tǐ)培養基(jī)?它(tā)的組分(fēn)有哪些(xiē)?

    2023-10-26 細(xì)胞培養(yǎng),是(shì)人(rén)工創(chuàng)造與體(tǐ)內生長相似的(dí)環境,使(shǐ)細(xì)胞生長,繁殖並維持主(zhǔ)要(yào)結構(gòu)和功能的技術(shù)。培(péi)養基是一(yī)切(qiē)體外培(péi)養的基(jī)礎,為(wéi)細(xì)胞的生(shēng)長(cháng)和代(dài)謝活動提(tí)供(gōng)了各(gè)種(zhǒng)必(bì)需的營(yíng)養(yǎng)物(wù)質(zhì)。根據(jù)培養基(jī)的來源(yuán)和組成成(chéng)分,它的發展(zhǎn)經(jīng)歷了三個(gè)階段,分(fēn)別是天然(rán)培養(yǎng)基階(jiē)段(duàn),合(hé)成(chéng)培養基(jī)階段(duàn)以(yǐ)及無血(xiě)清培養(yǎng)基階(jiē)段。那(nà)麼你知道(dào)什(shí)麼是液體培養(yǎng)基嗎?它的(dí)組(zǔ)分是什(shí)麼(mó)嗎?讓我們一(yī)起來看看吧!在(zài)20世(shì)紀50年(nián)代(dài),當(dāng)時(shí)體外培(péi)養普遍(biàn)直接采(cǎi)用(yòng)組織凝塊,生物(wù)性(xìng)液體和(hé)組織(zhī)提取(qǔ)液,如(rú)血漿凝(níng)塊,血清,淋(lín)巴液,胚胎浸(jìn)液等(děng),這(zhè)就(jiù)是天(tiān)然培養基階(jiē)段。由...
  • 液體培養(yǎng)基的常見問題(tí)有(yǒu)哪(nǎ)些?

    2023-10-26 液(yè)體培養(yǎng)基(jī)是(shì)最(zuì)為常見的(dí)培養(yǎng)基類型(xíng),它具(jù)有(yǒu)可進(jìn)行(háng)通(tōng)氣(qì)培養或振蕩(dàng)培(péi)養(yǎng)的優(yōu)勢,因為(wéi)它的(dí)流(liú)動性便(biàn)於精(jīng)確(què)控(kòng)製培養(yǎng)基(jī)的(dí)溶(róng)液溫(wēn)度(dù),營養濃度(dù)和(hé)氣(qì)體含量(liáng)等;它對細胞生(shēng)長(cháng)時(shí)的(dí)附(fù)著能力要求(qiú)小,細胞可(kě)快速(sù)擴(kuò)增(zēng);當(dāng)需(xū)要大(dà)量(liáng)細(xì)胞(bāo)培養時(shí)也更(gēng)經濟(jì)高效(xiào)。那(nà)麼(mó)你知(zhī)道液(yè)體培(péi)養(yǎng)基的常見問題(tí)有(yǒu)哪些嗎?讓(ràng)我們(mén)一起(qǐ)來看看吧(bā)!一(yī),液體培養(yǎng)基為(wéi)什(shí)麼顏色不一樣酚(fēn)紅(hóng)加(jiā)量不同(tóng),導致顏色差(chà)異(yì):DMEM>MEM>DMEM/F12>RPMI1640>F12&F10。二(èr),培養(yǎng)基(jī)放冰(bīng)箱裏顏色變深(shēn)空氣(qì)中(zhōng)CO2濃度(dù)低,培(péi)養基(jī)內CO2會(huì)逐(zhú)漸溢(yì)出(chū),...
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