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細(xì)胞胞內染色操作流(liú)程(chéng)是什麼？
2023-10-20 你(nǐ)知道細(xì)胞胞內染色操(cāo)作(zuò)流程是什(shí)麼嗎？讓我們(mén)一(yī)起來看看(kàn)吧(bā)！一(yī)，細(xì)胞計數將培養好(hǎo)的(dí)細(xì)胞收(shōu)集於15mL離(lí)心管(guǎn)並計數(shù)；500g離(lí)心4min，去(qù)上清。二，製(zhì)備單(dān)細(xì)胞(bāo)懸(xuán)液(yè)將(jiāng)收集(jí)的細胞用1mL0.5%BSA/PBS溶液(yè)重(zhòng)懸，400g離心3min，去上清(qīng)，重復2次；用0.5%BSA/PBS溶液(yè)重(zhòng)懸(xuán)細胞(bāo)至濃(nóng)度(dù)1x106個(gè)細(xì)胞(bāo)/mL，分配到(dào)96孔板中，每孔(kǒng)100μl細胞懸液(yè)，400g離(lí)心(xīn)5min去上(shàng)清(qīng)。三，固(gù)定(dìng)每(měi)孔加入100μl細(xì)胞固(gù)定(dìng)劑重懸(xuán)細(xì)胞(bāo)，2-8°孵(fū)育20min。四(sì)，洗滌400g離(lí)心5m...
免疫細胞（ICC）實(shí)驗步(bù)驟有哪些(xiē)？
2023-10-19 免疫(yì)細(xì)胞化(huà)學(ICC)是(shì)一種(zhǒng)使用熒光(guāng)抗(kàng)體或(huò)染料來檢測(cè)細(xì)胞(bāo)內靶(bǎ)抗原的技(jì)術。那麼(mó)你(nǐ)知(zhī)道免疫(yì)細(xì)胞(bāo)（ICC）實驗步(bù)驟有哪些(xiē)嗎？讓我們(mén)一起來(lái)看看吧(bā)！一(yī)，細(xì)胞培(péi)養/固(gù)定很多(duō)抗原在離體(tǐ)組織中隻(zhī)存在(zài)很短(duǎn)時間(jiān)，自溶（autolysis）和(hé)壞死（necrosis）使得(dé)抗(kàng)原進(jìn)一步降解(jiě)，組(zǔ)織形態(tài)和結構被(bèi)破壞。樣品浸泡在(zài)合(hé)適的(dí)固定液中(zhōng)，固定(dìng)液(yè)完quan滲透組織，使(shǐ)蛋白失(shī)去活(huó)性，並且使組織被保(bǎo)存(cún)，穩(wěn)定在接近(jìn)invivo狀態。二，通透處理通(tōng)透(tòu)即為(wéi)對細胞(bāo)膜進(jìn)行(háng)打孔處(chǔ)理(lǐ)，使(shǐ)抗體(tǐ)能進入到細胞中(zhōng)和抗原(yuán)發(fā)生結合。通...
免疫(yì)組化(huà)實驗常(cháng)見(jiàn)問(wèn)題(tí)有哪些？
2023-10-19 免(miǎn)疫組(zǔ)織(zhī)化學(xué)(immunohistochemistry，IHC)是(shì)一種綜合定性(xìng)，定位和定量；形(xíng)態(tài)，機能和(hé)代謝密切(qiē)結合(hé)為一體的(dí)研(yán)究和(hé)檢(jiǎn)測技術。在原位(wèi)檢(jiǎn)測出病(bìng)原的同(tóng)時(shí)，還(huán)能觀察到組織病變(biàn)與該病原的關係(xì)，確(què)認(rèn)受染細(xì)胞類型，從而(ér)有(yǒu)助於了解疾病(bìng)的發病機理(lǐ)和(hé)病理(lǐ)過(guò)程(chéng)。那(nà)麼(mó)你知道(dào)免疫(yì)組(zǔ)化(huà)實(shí)驗常見問題有哪(nǎ)些嗎？讓(ràng)我們(mén)一(yī)起來看看(kàn)吧！一(yī)，石(shí)蠟(là)切片再染(rǎn)色(sè)過程出現脫(tuō)片(piàn)現(xiàn)象1.烤片(piàn)時間(jiān)不(bù)夠，或溫度(dù)不夠，可以延長(cháng)烤(kǎo)片時間和提高烤(kǎo)片(piàn)溫度；2.用含有多聚賴(lài)氨酸的玻(bō)片(piàn)，可以購(gòu)買到(dào)或(huò)這自(zì)己做；3.有些組織本身就...
二代(dài)測(cè)序（NGS）的原(yuán)理
2023-10-18 DNA測(cè)序(xù)技術一直是分子(zǐ)生(shēng)物學相關(guān)研(yán)究中常用的技(jì)術手段之(zhī)一(yī)，從一定程度(dù)上(shàng)推(tuī)動(dòng)了該領域(yù)的快速發展(zhǎn)。每(měi)一(yī)代測序(xù)技(jì)術的更替(tì)都標誌著生物學(xué)中(zhōng)基(jī)因芯(xīn)片(piàn)，數(shù)據分(fēn)析(xī)，表(biǎo)麵(miàn)化學，生物工程(chéng)等(děng)技(jì)術領域有了新(xīn)的突破，使(shǐ)測序向(xiàng)著(zhuó)高通量(liáng)，低(dī)成本，高(gāo)安全性(xìng)和商業(yè)化(huà)的(dí)方(fāng)向發展。那麼二代(dài)測序(NGS)的(dí)原(yuán)理是什麼(mó)？讓我(wǒ)們一起來(lái)看(kàn)看吧！第(dì)二(èr)代(dài)測序(xù)(NGS)又稱為高通(tōng)量(liáng)測序(High-throughputsequencing)，是(shì)基於(yú)PCR和(hé)基因芯(xīn)片(piàn)發展而(ér)來(lái)的DNA測序技術。二代測序(xù)引入(rù)了(liǎo)可(kě)逆(nì)終(zhōng)止(zhǐ)末(mò)端，從(cóng)而實(shí)現...
支原體汙染的檢(jiǎn)測(cè)方法(fǎ)有哪些？
2023-10-18 支(zhī)原(yuán)體汙染一(yī)般(bān)在顯微鏡下(xià)不可(kě)見，很難(nán)察覺(jué)，但細(xì)胞(bāo)會(huì)受(shòu)到(dào)極大(dà)的損(sǔn)傷(shāng)，主(zhǔ)要通過以(yǐ)下途徑(jìng)影響(xiǎng)細(xì)胞生(shēng)長及功能(néng)。那麼支原(yuán)體(tǐ)汙(wū)染(rǎn)的檢測(cè)方(fāng)法有(yǒu)哪些呢？讓我們(mén)一起(qǐ)來看(kàn)看吧！一，分(fēn)離(lí)培養(yǎng)法(fǎ)檢測方(fāng)法(fǎ)：將(jiāng)待檢樣品(pǐn)接種到(dào)適(shì)合支原體(tǐ)生(shēng)長(cháng)的液體培養(yǎng)基或(huò)固體培養基(jī)中，如有支原體汙染，液體(tǐ)培養基顏(yán)色(sè)會(huì)改變，固體培養基將(jiāng)會有菌落(là)生長(cháng)。優(yōu)點：該(gāi)方(fāng)法(fǎ)被稱為(wéi)支(zhī)原體(tǐ)培(péi)養(yǎng)法的(dí)金標準，可(kě)以(yǐ)檢(jiǎn)測絕(jué)大(dà)多(duō)數(shù)支(zhī)原(yuán)體(tǐ)。缺點：支(zhī)原體生長(cháng)到一(yī)定數(shù)量才能(néng)判斷(duàn)是(shì)否有汙染(rǎn)，檢(jiǎn)測時間(jiān)長，無法實現對支原(yuán)體的快(kuài)速檢測二，原位(wèi)染(rǎn)色(sè)法檢測方法：通過(guò)染(rǎn)...
細胞被支原(yuán)體(tǐ)汙染，該(gāi)怎麼(mó)辦？
2023-10-18 支(zhī)原體(tǐ)是目前為止發現(xiàn)的(dí)最小的原核(hé)生物(wù)，支(zhī)原(yuán)體(tǐ)汙(wū)染(rǎn)一(yī)般在(zài)顯微(wēi)鏡(jìng)下不(bù)可見(jiàn)，很難察(chá)覺(jué)，但細胞會受到極(jí)大(dà)的損傷，主要通(tōng)過(guò)以下(xià)途徑影響細(xì)胞生長(cháng)及(jí)功能。那麼(mó)細胞(bāo)被(bèi)支原體汙染，該怎麼辦呢(ní)？讓我(wǒ)們(mén)一(yī)起來(lái)看看吧(bā)！一(yī)，支(zhī)原體汙染的(dí)來(lái)源1.環境汙(wū)染(rǎn)：如(rú)細胞培養房(fáng)，細胞培(péi)養箱(xiāng)，超淨工作台(tái)內(nèi)已(yǐ)被支原體汙染(rǎn)；2.實驗器(qì)材(cái)的汙(wū)染(rǎn)：移液槍(qiāng)，移液管，細(xì)胞(bāo)培(péi)養皿，水浴(yù)鍋等(děng)；3.細(xì)胞培養(yǎng)試(shì)劑的(dí)汙染：培(péi)養(yǎng)基(jī)，胰酶，血(xiě)清，細胞(bāo)凍存(cún)液(yè)等；二(èr)，處(chǔ)理方(fāng)法1.及(jí)時(shí)更換培養液(yè)：可以減緩支原體的(dí)汙(wū)染，但不能wan全清(qīng)除；2.使用...
夾心法(fǎ)與競爭(zhēng)法(fǎ)的(dí)ELISA檢(jiǎn)測(cè)原(yuán)理是(shì)什麼？
2023-10-18 ELISA的原理(lǐ)是以免疫學反應(yīng)為(wéi)基(jī)礎(chǔ)，將抗原(yuán)，抗體的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)反應與(yǔ)酶(méi)對底(dǐ)物(wù)的(dí)高效催(cuī)化作用相(xiāng)結(jié)合(hé)起來(lái)的(dí)一(yī)種敏感(gǎn)性很高的(dí)試驗技術。在(zài)實際(jì)應(yīng)用中(zhōng)，通過不同的設計(jì)，具(jù)體的方法步(bù)驟可(kě)有多(duō)種(zhǒng)。那(nà)麼你(nǐ)知道夾(jiā)心(xīn)法與競(jìng)爭(zhēng)法的ELISA檢測(cè)原(yuán)理(lǐ)是什(shí)麼(mó)嗎？讓(ràng)我(wǒ)們一(yī)起(qǐ)來看看(kàn)吧！一(yī)，夾(jiā)心(xīn)法原(yuán)理夾(jiā)心(xīn)法使(shǐ)用的(dí)是兩個抗體夾抗(kàng)原或(huò)者兩個抗(kàng)原(yuán)夾抗(kàng)體(tǐ)的(dí)方(fāng)法，這(zhè)種復合物(wù)被稱(chēng)之(zhī)為三明治夾(jiā)心結構，利用一(yī)對(duì)配對wan全的抗體(tǐ)，可以特異(yì)性檢測抗(kàng)原，當然主(zhǔ)要(yào)針對(duì)的是具有至少(shǎo)2個(gè)以(yǐ)上抗原表位(wèi)的抗(kàng)原，抗體(tǐ)的配對(duì)可是門技術活，很多公(gōng)...
直接法(fǎ)與間接法的ELISA檢測(cè)原(yuán)理(lǐ)是(shì)什麼(mó)？
2023-10-18 在實(shí)際應(yīng)用中，通(tōng)過不同(tóng)的設計(jì)，具(jù)體的方法(fǎ)步驟可(kě)有多種。即：用於檢(jiǎn)測(cè)抗體(tǐ)的(dí)間接(jiē)法，用於(yú)檢測(cè)抗(kàng)原的雙(shuāng)抗(kàng)體夾(jiā)心法以及用於(yú)檢測小(xiǎo)分子抗原或(huò)半抗(kàng)原的(dí)抗原(yuán)競(jìng)爭法等(děng)等。那麼(mó)你知道直接(jiē)法與(yǔ)間(jiān)接法(fǎ)的(dí)ELISA檢測原(yuán)理是(shì)什麼嗎(má)？讓我們(mén)一起來看看(kàn)吧！一(yī)，直接法原(yuán)理直接法是(shì)利用(yòng)包(bāo)被(bèi)抗(kàng)原，檢測(cè)抗體(tǐ)或者(zhě)進行(háng)重(zhòng)組蛋(dàn)白(bái)的(dí)活性(xìng)驗證，利(lì)用(yòng)蛋白(bái)與板材（即微孔板(bǎn)底(dǐ)）通(tōng)過(guò)疏水鍵(jiàn)，流(liú)水/離(lí)子鍵(jiàn)的被動吸附(fù),通(tōng)過引入其它(tā)活(huó)性基(jī)團如(rú)氨基和(hé)碳基的共(gòng)價結(jié)合，以(yǐ)及(jí)通過表麵改(gǎi)性後的親水(shuǐ)鍵(jiàn)結(jié)合(hé)等(děng)等(děng)，當(dāng)然也有利用(yòng)親(qīn)和(hé)素預包被(bèi)的(dí)板材，通(tōng)過(guò)...

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