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什(shí)麼是熒光原位(wèi)雜(zá)交？
2023-08-23 熒(yíng)光原位雜交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）是一門新興(xīng)的分子(zǐ)細(xì)胞遺(yí)傳(chuán)學(xué)技術(shù)，是20世紀80年代末(mò)期在原(yuán)有(yǒu)的(dí)放射性原(yuán)位雜(zá)交(jiāo)技術的基礎上發展起(qǐ)來的一(yī)種(zhǒng)非放(fàng)射性原位雜交技(jì)術(shù)。目前這(zhè)項(xiàng)技術已經廣泛(fàn)應用於動植物(wù)基(jī)因組結(jié)構(gòu)研究，染色體精細結構變異分(fēn)析，病毒感(gǎn)染分(fēn)析，人(rén)類產前診斷，腫瘤遺傳學(xué)和基因(yīn)組進化研(yán)究待許多領(lǐng)域。FISH的(dí)基本原(yuán)理是用(yòng)已(yǐ)知的(dí)標(biāo)記單鏈核酸(suān)為探針(zhēn)，按(àn)照鹼(jiǎn)基互補(bǔ)的原(yuán)則，與待檢材料中(zhōng)未知的單(dān)鏈(liàn)核(hé)酸進(jìn)行異(yì)性結(jié)合，形成(chéng)可被檢測的雜(zá)交(jiāo)雙(shuāng)鏈核(hé)...
蛋(dàn)白(bái)質(zhì)定(dìng)量(liáng)有哪(nǎ)些方(fāng)法(fǎ)？
2023-08-22 蛋(dàn)白定(dìng)量是蛋白分(fēn)離(lí)和分(fēn)析前(qián)必須的(dí)一個重要步驟(zhòu)，蛋白(bái)色譜(pǔ)分離，蛋(dàn)白質(zhì)電泳(yǒng)分析，蛋白(bái)質免疫分離和分析(xī)，細胞(bāo)裂解(jiě)釋放的總(zǒng)蛋白(bái)定量(liáng)，蛋白分子的(dí)標(biāo)記(jì)，蛋(dàn)白(bái)結(jié)構(gòu)分析(xī)等，都(dū)需要(yào)可靠(kào)的(dí)定量(liáng)分析作為基礎(chǔ)。蛋(dàn)白定(dìng)量(liáng)分(fēn)析應(yīng)用(yòng)的領域包括(kuò)生物(wù)科(kē)學，食(shí)品檢驗(yàn)，臨床檢驗(yàn)等等。蛋白(bái)質(zhì)定(dìng)量有哪些(xiē)方(fāng)法？讓我(wǒ)們一起(qǐ)來(lái)看看吧(bā)！一，比(bǐ)色法(fǎ)蛋(dàn)白(bái)定量常使用的方法是比色法(fǎ)，通常(cháng)用(yòng)於(yú)總(zǒng)蛋(dàn)白的定(dìng)量(liáng)分析(xī)。根據蛋(dàn)白(bái)和比色試(shì)劑的結(jié)合(hé)，可以將比色法分(fēn)為(wéi)：蛋白(bái)-染料結合(hé)法(fǎ)和(hé)蛋白(bái)-銅(tóng)螯合化(huà)學試(shì)劑法。前者對應的典(diǎn)型蛋(dàn)白(bái)定量(liáng)比(bǐ)色法(fǎ)是考馬(mǎ)斯亮(liàng)藍(lán)...
WB實驗中(zhōng)條(tiáo)帶(dài)不(bù)跑(pǎo)歪(wāi)的(dí)秘(mì)訣(jué)
2023-08-21 在做(zuò)Westernblot實(shí)驗時，你(nǐ)一(yī)定會遇(yù)到各(gè)式(shì)各樣的條帶，最常(cháng)見的(dí)就是(shì)條(tiáo)帶跑(pǎo)歪(wāi)了，如凹型條(tiáo)帶(dài)，凸型(xíng)條帶，斜條帶，條(tiáo)帶(dài)拖尾等。如(rú)何(hé)更(gēng)好(hǎo)的(dí)做好WB實驗，讓我們(mén)一起(qǐ)來看(kàn)看WB實(shí)驗(yàn)中(zhōng)條帶不跑歪的秘(mì)訣吧！一，凹(āo)凸(tū)條帶的原因和(hé)解決(jué)辦法可(kě)能原因(yīn)：可能(néng)是(shì)由於膠未配(pèi)好(hǎo)（凝膠(jiāo)未能(néng)wan全聚合，膠中有(yǒu)顆(kē)粒或氣泡，凝(níng)膠(jiāo)未冷(lěng)卻(què)好(hǎo)，），也可(kě)能是(shì)電壓過高。解決方法：正(zhèng)確(què)添(tiān)加質(zhì)量合格且(qiě)未過期(qī)的(dí)AP及TEMED；過濾(lǜ)配(pèi)膠(jiāo)的試劑(jì)保(bǎo)證配膠過程中(zhōng)膠內(nèi)無氣(qì)泡；凝膠冷卻好後(hòu)再(zài)上樣；降低(dī)電壓。二，條帶出(chū)現(xiàn)黑點或(huò)黑斑的...
Q-pcr 和 RT-pcr 有啥區(qū)別？
2023-08-21 Q-PCR和RT-PCR都是分子生(shēng)物(wù)學中(zhōng)常用的技(jì)術，用(yòng)於檢測和(hé)定量特(tè)定的核(hé)酸序(xù)列。Q-pcr和RT-pcr有啥區別(bié)？它們的(dí)原理(lǐ)和應(yīng)用類型相同嗎(má)？今天讓(ràng)我(wǒ)們(mén)一起(qǐ)來了解(jiě)一(yī)下(xià)吧(bā)！一(yī)，Q-pcr和RT-pcr原(yuán)理上(shàng)的不同(tóng)Q-PCR也是基於(yú)PCR的(dí)技(jì)術，但(dàn)它引(yǐn)入了熒光探(tàn)針(zhēn)或(huò)熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料來(lái)實(shí)時(shí)監測PCR反應(yīng)的(dí)進程(chéng)。熒光信(xìn)號(hào)的(dí)強度與目標序列的數量成(chéng)正比，因此可以定量(liáng)地測量起始(shǐ)樣(yàng)品(pǐn)中的目標核酸(suān)數量(liáng)。RT-PCR結合了(liǎo)逆轉錄（ReverseTranscription）和聚合酶(méi)鏈式反(fǎn)應(yīng)（PCR）的過(guò)...
PolyPlus轉染(rǎn)試(shì)劑jetPRIME®產品問(wèn)題(tí)匯(huì)總(zǒng)
2023-08-18 問(wèn)題一：化(huà)合(hé)物Q：INTERFERin®是什(shí)麼(mó)類型的化合物(wù)？A：INTERFERin®是新一代的(dí)非脂質體(tǐ)陽(yáng)離子(zǐ)兩性(xìng)分(fēn)子(zǐ)轉(zhuǎn)染試劑，專(zhuān)為(wéi)培養的哺乳動物細胞(bāo)的siRNA轉染而開發。使(shǐ)用(yòng)INTERFERin®，加(jiā)入(rù)1nM的siRNA就(jiù)能(néng)達到90%以上(shàng)的沉(chén)默效率。問(wèn)題二：細(xì)胞Q:INTERFERin®已成(chéng)功(gōng)轉染(rǎn)的(dí)細胞係(xì)有哪些？A:INTERFERin®已被成功(gōng)用(yòng)於多種貼(tiē)壁細(xì)胞和(hé)非貼壁細(xì)胞係(xì)，例(lì)如(rú)HeLa，HEK-293,A549MDA-MB-23...
CRISPR Cas9酶是(shì)一種基(jī)因編(biān)輯(jí)工(gōng)具
2023-08-18 CRISPRCas9酶是一(yī)種基(jī)因(yīn)編輯(jí)工(gōng)具(jù)，用(yòng)於修改(gǎi)生(shēng)物體的(dí)基因組。CRISPR(ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats)是一(yī)種存在於細(xì)菌和古細菌中的一類(lèi)DNA序列，而Cas9(CRISPR-associatedprotein9)是CRISPR係統中(zhōng)的一(yī)種酶。從細菌中發(fā)現(xiàn)的(dí)一種天(tiān)然(rán)的免(miǎn)疫係(xì)統，用於(yú)抵(dǐ)御病毒(dú)入(rù)侵。它通(tōng)過記(jì)錄病(bìng)毒的DNA片(piàn)段(duàn)，並將其整(zhěng)合(hé)到自身的基因組中(zhōng)，形成(chéng)CRISPR序列。當(dāng)同(tóng)一病毒(dú)再次入侵時，CR...
原代細胞(bāo)如何(hé)獲(huò)取(qǔ)？
2023-08-17 原代細胞(bāo)(primarycell)：是(shì)指(zhǐ)從(cóng)機體(tǐ)的組織(如人組(zǔ)織(zhī)，小(xiǎo)鼠(shǔ)組(zǔ)織(zhī)，大鼠組織和(hé)兔(tù)組(zǔ)織(zhī)等)經蛋(dàn)白酶(méi)或(huò)其它的方法獲得(dé)單個(gè)細(xì)胞並(bìng)在體外進(jìn)行(háng)模擬機(jī)體培養的(dí)細(xì)胞(bāo)，稱為原代細(xì)胞(bāo)。一(yī)般(bān)認為，培養(yǎng)的原(yuán)代的(dí)第(dì)1代(dài)細胞和傳代到(dào)第10代(dài)以內(nèi)的細胞統稱為(wéi)原(yuán)代(dài)細(xì)胞培(péi)養。原(yuán)代細胞(bāo)的(dí)獲(huò)取(qǔ)難(nán)度大(dà)，需要(yào)考慮(lǜ)的(dí)問(wèn)題多，原代細胞(bāo)如何獲取？原代(dài)細胞(bāo)的獲取(qǔ)，就是從活體上將(jiāng)組織分解成單(dān)個細胞再進行培養(yǎng)的(dí)過(guò)程(chéng)，且整(zhěng)個過程要求無菌(jūn)操(cāo)作。具(jù)體(tǐ)要考(kǎo)慮(lǜ)的(dí)問題有(yǒu)：組織分(fēn)解的方式，培(péi)養(yǎng)的時(shí)間(jiān)，換液(yè)時間(jiān)，細胞狀態(tài)判(pàn)斷和(hé)凍存(cún)。一，...
懸浮細胞如(rú)何進(jìn)行傳代(dài)培(péi)養(yǎng)？
2023-08-16 懸浮(fú)細(xì)胞(bāo)傳代(dài)是一(yī)項重要的(dí)實(shí)驗操(cāo)作(zuò),它可以幫(bāng)助研究(jiū)人(rén)員(yuán)擴增(zēng)和維持細(xì)胞株。懸(xuán)浮細(xì)胞如何(hé)進行傳代呢？一，懸浮細(xì)胞的傳(chuán)代(dài)懸浮(fú)細(xì)胞(bāo)傳代比貼壁細(xì)胞傳代稍微(wēi)簡單一些。由(yóu)於細胞(bāo)已(yǐ)經在生長培(péi)養(yǎng)基(jī)中懸(xuán)浮(fú)，因此無需通過酶(méi)的(dí)作用使其(qí)從(cóng)培養(yǎng)容(róng)器(qì)表(biǎo)麵脫(tuō)離(lí)，整(zhěng)個過程較為迅速(sù)，對細胞的損傷也較(jiào)小。懸浮生長細(xì)胞的(dí)傳代(dài)培養要(yào)比貼壁(bì)細胞簡單得(dé)多(duō)，通(tōng)常有兩種(zhǒng)方法。1.直接(jiē)給(gěi)帶(dài)傳(chuán)代的(dí)培養瓶(píng)中(zhōng)補充一(yī)定量的新(xīn)鮮(xiān).培(péi)養基，然後(hòu)將進(jìn)行分(fēn)裝。2.先(xiān)通(tōng)過(guò)離(lí)心(xīn)棄掉(diào)營養(yǎng)匱(kuì)乏的舊培養基，然(rán)後再用適量的(dí)新鮮培(péi)養(yǎng)基(jī)重懸細胞(bāo)沉澱，最後將其(qí)分(fēn)...

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